Question

18．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑（含氮有機化合物）在土壤中不易降解，長期使用可污染土壤．為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）．

（1）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理．
（2）要從長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基．對培養(yǎng)基進行滅菌，常采用的方法是高壓蒸汽滅菌．實驗操作者的雙手用70%酒精消毒．
（3）在第2次及其后劃線總從上次劃線末端開始的原因是劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少（每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落）
（4）培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長的主要原因是培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長．
（5）在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是氮氣，有透明帶菌落利用的氮源主要是該除草劑，據(jù)此可篩選出目的菌．

Answer 1

分析 據(jù)圖分析：該實驗是從土壤中篩選分離能降解除草劑的微生物的過程．這樣的實驗要將土壤稀釋處理，以除草劑為唯一的氮源進行處理篩選土壤微生物，以菌落計數(shù)法進行統(tǒng)計計數(shù)．

解答 解：（1）1）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理．
（2）從物理性質(zhì)方面來看，題圖培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；從用途方面來看，該培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．對培養(yǎng)基進行滅菌，常采用的方法是高壓蒸汽滅菌．實驗操作者的雙手用70%酒精消毒．
（3）在作第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的原因是（劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少），每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落．
（4）在以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上，不能降解該除草劑的細(xì)菌（除具有固氮能力的細(xì)菌外）是不能生長的．
（5）無透明帶菌落利用的氮源主要是氮氣，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明，形成透明圈是由于該除草劑被某些細(xì)菌降解．
故答案為：
（1）稀釋
（2）固     高壓蒸汽滅菌  70%酒精
（3）劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少（每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落）
（4）培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源
（5）氮氣   該除草劑

點評 解答此類題目的關(guān)鍵是對土壤中微生物的分離這個實驗的熟練掌握，和在微生物實驗中的無菌操作相關(guān)知識的熟練應(yīng)用．