Question

請分析回答下列問題：
（1）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是：計算、稱量、

 

、滅菌、

 

；
（2）培養(yǎng)基滅菌的常用方法是

 

．如何證明所用培養(yǎng)基已經(jīng)徹底滅菌？

 

．
（3）分解纖維素的微生物可以從土壤中分離獲得，分離的基本過程如下：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落．其中選擇培養(yǎng)的目的是

 

，選擇培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基中唯一的碳源是

 

．鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中需要加入的特殊物質(zhì)是

 

，該物質(zhì)能夠與纖維素反應(yīng)生成

 

；如果某個菌落的周圍出現(xiàn)了透明圈，說明該種微生物能夠

 

．
（4）食品安全檢測時通常采用大腸桿菌作為致病微生物的指示菌，為測定哪些菌落屬于大腸桿菌，可選用

 

培養(yǎng)基對該菌落進行鑒定，大腸桿菌的菌落在該培養(yǎng)基上呈現(xiàn)

 

色．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),培養(yǎng)基對微生物的選擇作用

專題：

分析：制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是：計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板；
常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌；
微生物的分離是研究和利用微生物的第一步，也是微生物工作的基本方法和重要環(huán)節(jié)．土壤中的微生物很多，要從土壤中獲得分解纖維素的菌．接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，平板劃線分離法：由接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落．
用途：一般多用于從菌種的純化；稀釋平板計數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個菌落，即是由一個單細胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計的計數(shù)方法，即一個菌落代表一個單細胞．計數(shù)時，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在（否則一個菌落就不只是代表一個細胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)．
用途：一般多用于篩選菌株．一般用于平板培養(yǎng)基的回收率計數(shù)．剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．

解答： 解：（1）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是：計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板；
（2）培養(yǎng)基滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌，要證明所用培養(yǎng)基已經(jīng)徹底滅菌只需對未接種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，如無菌落出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基滅菌徹底．
（3）分解纖維素的微生物的基本過程如下：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落，其中選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需的微生物，選擇培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基中唯一的碳源是纖維素，別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中需要加入的特殊物質(zhì)是剛果紅，該物質(zhì)能夠與纖維素反應(yīng)生成紅色復(fù)合物，如果某個菌落的周圍出現(xiàn)了透明圈，說明該種微生物能夠產(chǎn)生纖維素酶，能夠分解纖維素．
（4）為測定哪些菌落屬于大腸桿菌，可選用伊紅美藍培養(yǎng)基對該菌落進行鑒定，大腸桿菌的菌落在該培養(yǎng)基上呈現(xiàn)黑色．
故答案為：
（1）溶化 倒平板
（2）高壓蒸汽滅菌   對未接種的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，如無菌落出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基滅菌徹底
（3）增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需的微生物   纖維素 剛果紅 紅色復(fù)合物 產(chǎn)生纖維素酶，能夠分解纖維素
（4）伊紅美藍 黑色

點評：微生物這部分內(nèi)容是高考試題的一個熱點一般體現(xiàn)在對能源的利用，考察的知識點有微生物的無菌操作、微生物的分離以及鑒定，注意總結(jié)．