Question

【題目】Rag2基因（核基因重組激活基因）缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞，從而導(dǎo)致先天性免疫缺陷．科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行如下圖所示的基因治療．其技術(shù)流程如圖：

（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)箱中常加入95%和5%的CO2 ， CO2的主要作用是 ． 培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便 ， 防止其積累對(duì)細(xì)胞造成危害．
（2）進(jìn)行核移植的供體細(xì)胞一般用培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞，其原因是10代以內(nèi)的細(xì)胞 ．
（3）進(jìn)行步驟①時(shí)，卵母細(xì)胞需發(fā)育到期；步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到期時(shí)，可從其分離出ES細(xì)胞，在此之后的發(fā)育過(guò)程中，還可以從中分離出ES細(xì)胞．
（4）選用Rag2基因缺失小鼠自身的體細(xì)胞經(jīng)過(guò)如上圖流程獲得的造血干細(xì)胞對(duì)小鼠進(jìn)行治療，其好處是可以避免 ．

Answer 1

【答案】
（1）維持培養(yǎng)液的pH；去除代謝產(chǎn)物
（2）能保持正常的二倍體核型
（3）MⅡ中；囊胚；內(nèi)細(xì)胞團(tuán)；原始性腺
（4）免疫排斥反應(yīng)
【解析】解：（1.）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)箱中常加入95%和5%的CO2 ， CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便去除代謝產(chǎn)物，防止其積累對(duì)細(xì)胞造成危害．
（2.）進(jìn)行核移植的供體細(xì)胞一般用培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞，其原因是10代以內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型．
（3.）進(jìn)行步驟①時(shí)，卵母細(xì)胞需發(fā)育到MⅡ中期；步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出ES細(xì)胞，在此之后的發(fā)育過(guò)程中，還可以從原始性腺中分離出ES細(xì)胞．
（4.）選用Rag2基因缺失小鼠自身的體細(xì)胞經(jīng)過(guò)如上圖流程獲得的造血干細(xì)胞對(duì)小鼠進(jìn)行治療，其好處是可以避免免疫排斥反應(yīng)．
【考點(diǎn)精析】根據(jù)題目的已知條件，利用動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程的相關(guān)知識(shí)可以得到問(wèn)題的答案，需要掌握取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．