Question

回答基因工程的有關(guān)問(wèn)題：(共9分)

（1）構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí)，用不同類型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生黏性末端，也可能產(chǎn)生_____末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接，則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生_____（相同，不同）黏性末端的限制酶。

（2）利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí)，構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因等，其中RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位是_____。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，常用_____處理大腸桿菌，以利于表達(dá)載體進(jìn)入。為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可用放射性同位素標(biāo)記的______ 作探針與mRNA雜交，該雜交技術(shù)稱為_(kāi)_____。為了檢測(cè)胰島素基因轉(zhuǎn)錄的mRNA是否翻譯成胰島素，常用______          技術(shù)。

(3)如果要將某目的基因通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的_____中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，通過(guò)DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞的______上。

 

Answer 1

【答案】

（1）平   相同（2）啟動(dòng)子    Ca²⁺    目的基因（或胰島素基因）   分子雜交技術(shù)  抗原-----抗體雜交（3）T—DNA    染色體DNA

【解析】

試題分析：用限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生黏性末端，也可能產(chǎn)生平口末端。若要在限制酶基因工程中，往往采用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒以產(chǎn)生相同的黏性末端，再用DNA連接酶使其直接進(jìn)行連接。RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位是啟動(dòng)子。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)，常用Ca²⁺處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，以利于表達(dá)載體進(jìn)入。為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可采用分子雜交技術(shù)，即用放射性同位素標(biāo)記的胰島素基因作探針與mRNA雜交；了檢測(cè)胰島素基因轉(zhuǎn)錄的mRNA是否翻譯成胰島素，可采抗原-----抗體雜交技術(shù)。如果要將某目的基因通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T—DNA中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，通過(guò)DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞的染色體DNA上。

考點(diǎn)：本題考查基因工程的相關(guān)內(nèi)容。

點(diǎn)評(píng)：本題意在考查考生的識(shí)記能力，屬于容易題。