Question

【題目】小鼠的某種抗體由輕鏈和重鏈組成，科學家將編碼輕鏈和重鏈的基因分別導入兩個不同的煙草植物體內(nèi)，然后讓兩株植物進行雜交就能獲得可同時編碼輕鏈和重鏈兩種多肽的植株，即合成小鼠抗體的轉(zhuǎn)基因植物�；卮鹣铝袉栴}：

（1）若要獲取小鼠的編碼輕鏈和重鏈的基因，可以先提取小鼠漿細胞中編碼兩條鏈的mRNA，然后通過

過程獲取小鼠的cDNA，并利用 技術對目的基因進行擴增。

（2）在構建基因表達載體時，需要用到的工具酶有 ，基因表達載體中的目的基因兩端的序列分別是 和 。

（3）用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入植物細胞的過程中，常常將目的基因插入到農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的

上。檢測目的基因是否導入受體細胞可用DNA分子雜交技術，一般用標記的 作探針。

（4）若想大規(guī)模培育能合成小鼠抗體的轉(zhuǎn)基因植物，可采用 技術。

Answer 1

【答案】

（1）逆轉(zhuǎn)錄（2分） PCR（2分）

（2）限制酶和DNA連接酶（1分） 啟動子（2分） 終止子（2分）

（3）T—DNA （2分） 目的基因（2分）

（4）植物培養(yǎng)（2分）

【解析】

（1）由mRNA獲得cDNA的過程是逆轉(zhuǎn)錄，在體外進行擴增DNA用PCR技術，故是逆轉(zhuǎn)錄和PCR。

（2）構建基因表達載體需要用限制酶和DNA連接酶，基因表達載體中至少應有啟動子、終止子、目的基因和標記基因，而啟動子位于前面，終止子位于后面。

（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是利用農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA具有轉(zhuǎn)移DNA的特性，所以應將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上。檢測基因是否導入到受體細胞可以用DNA分子雜交技術，此時的探針是用標記的目的基因。

（4）要大規(guī)模培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因植物可以用植物組織培養(yǎng)技術。

生物種類	植物	動物	微生物
常用方法	農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法	顯微注射技術	感受態(tài)細胞法
受體細胞	體細胞或受精卵	受精卵	原核細胞
轉(zhuǎn)化過程	將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的TDNA上→農(nóng)桿菌→導入植物細胞→整合到受體細胞染色體的DNA上→表達	將含有目的基因的表達載體提純→取卵（受精卵）→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動物	Ca2＋處理細胞→感受態(tài)細胞→重組表達載體DNA分子與感受態(tài)細胞混合→感受態(tài)細胞吸收DNA分子