Question

苦馬豆素（SW）最早是從植物灰苦馬豆中分離獲得，為了研究SW是否具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，學(xué)者做了大量研究，相關(guān)實(shí)驗(yàn)過(guò)程及結(jié)果如下：
①取小鼠肝癌Hepal6細(xì)胞；
②制成單細(xì)胞懸液，等量接種于多孔板，加入等量細(xì)胞培養(yǎng)液，每組設(shè)5個(gè)平行孔；
③于37℃、5% CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h；
④加入等量不同濃度的SW溶液，于37℃、5% CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
⑤分別在24h、48h、72h時(shí)搖勻后吸取培養(yǎng)液，觀察并記錄結(jié)果，得到不同濃度的SW對(duì)細(xì)胞存活率的影響曲線，如圖所示：
⑥將培養(yǎng)48h的培養(yǎng)液離心，細(xì)胞染色，在熒光顯微鏡下觀察拍照，記錄癌細(xì)胞和凋亡細(xì)胞的數(shù)目，并采用免疫熒光細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡蛋白Bax和Bcl2的表達(dá)量狀況，匯總統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下表：
培養(yǎng)48h后細(xì)胞數(shù)目及凋亡蛋白Bax和Bcl2的表達(dá)水平

SW（μg/mL）	癌細(xì)胞數(shù)目	凋亡細(xì)胞數(shù)目	Bax蛋白	Bcl2蛋白
0	++++	+	+	++++
0.5	+++	++	++	+++
1	++	+++	+++	++
2	+	++++	++++	+

（注：“+”的數(shù)量表示相對(duì)值的大�。�
請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行小鼠肝癌Hepal6細(xì)胞培養(yǎng)的原理是

 

．培養(yǎng)箱中要有適量的無(wú)菌空氣，原因是

 

．肝癌細(xì)胞數(shù)量增多擴(kuò)展時(shí)，細(xì)胞能相互重疊向三維空間發(fā)展，形成堆積物，可能的原因是

 

．
（2）實(shí)驗(yàn)步驟③中“于37℃、5% CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h”的目的是

 

．
（3）分析圖中曲線可知，SW對(duì)肝癌Hepal6細(xì)胞的作用效果是

 

．
（4）表中結(jié)果表明SW可以誘發(fā)細(xì)胞

 

，從而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)．從兩種蛋白質(zhì)的表達(dá)水平來(lái)看，Bax蛋白和Bcl2蛋白對(duì)癌細(xì)胞凋亡的作用分別是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程,惡性腫瘤的防治

專題：

分析：分析表格：隨著SW濃度的增加，癌變的細(xì)胞減少，凋亡的細(xì)胞增多，可以得出SW可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；同時(shí)，可以看出Bax蛋白隨著SW濃度增加而增加，Bcl-2蛋白著SW濃度增加而減少．
分析曲線圖：SW濃度越高，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)（存活）的抑制作用越強(qiáng)；SW作用時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)（存活）的抑制作用越強(qiáng)．

解答： 解：（1）實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行小鼠肝癌Hepal6細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖．培養(yǎng)箱中要有適量的無(wú)菌空氣，原因是促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸、防止雜菌感染．肝癌細(xì)胞數(shù)量增多擴(kuò)展時(shí)，細(xì)胞能相互重疊向三維空間發(fā)展，形成堆積物，可能的原因是癌細(xì)胞無(wú)接觸抑制．
（2）實(shí)驗(yàn)步驟③中“于37℃、5% CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h”的目的是增加肝癌Hepal6細(xì)胞的數(shù)量．
（3）分析圖中曲線可知，SW對(duì)肝癌Hepal6細(xì)胞的作用效果是：相同條件下，SW濃度越高，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)（存活）的抑制作用越強(qiáng)；SW作用時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)（存活）的抑制作用越強(qiáng)．
（4）表中結(jié)果表明SW可以誘發(fā)細(xì)胞凋亡，從而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)．從兩種蛋白質(zhì)的表達(dá)水平來(lái)看，Bax蛋白促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡，Bcl2蛋白抑制癌細(xì)胞凋亡．
故答案為：
（1）細(xì)胞增殖（細(xì)胞分裂、有絲分裂、細(xì)胞克�。�   　促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸、防止雜菌感染　癌細(xì)胞無(wú)接觸抑制
（2）增加（擴(kuò)大）肝癌Hepal6細(xì)胞的數(shù)量
（3）相同條件下，SW濃度越高，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)（存活）的抑制作用越強(qiáng)；SW作用時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)（存活）的抑制作用越強(qiáng)
（4）凋亡　   促進(jìn)（癌細(xì)胞凋亡）、抑制（癌細(xì)胞凋亡）

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合圖表，考查動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆，意在考查考生具有對(duì)一些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行初步探究的能力，具備驗(yàn)證簡(jiǎn)單生物學(xué)事實(shí)的能力，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理．動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合、單克隆抗體、胚胎移植、核移植等，其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)．