Question

【題目】高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，操作流程如下：采集樣品→富集培養(yǎng)→分離、純化培養(yǎng)→篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌→保存?zhèn)溆谩?/span>

（1）從用途上來說，富集培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基；進行分離、純化培養(yǎng)時，要先將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，制成平板。此時所使用的培養(yǎng)基與富集培養(yǎng)時有所不同，其中添加了一定量的________。之后用______法接種，若該過程所得平板上的平均菌落數(shù)為50個，稀釋倍數(shù)為105時，則每毫升樣品中的細菌數(shù)為______個。

（2）培養(yǎng)基配置和滅菌時，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是________；實驗室中常使用________（設(shè)備）對培養(yǎng)基滅菌。

（3）若菌落的大小大致相同，菌落發(fā)生的時間也相同，__________（填“能”或“不能”）僅根據(jù)菌落周圍透明圈的大小來判斷該菌落所產(chǎn)生的淀粉酶單位酶量酶活力的高低，理由是____________。

Answer 1

【答案】選擇 瓊脂 稀釋涂布平板 5×107 先調(diào)節(jié)pH，后滅菌 高壓蒸汽滅菌鍋 不能 透明圈的大小可能是不同菌落產(chǎn)生的酶量不同導致（或酶活力相同時，酶量越大，透明圈就越大

【解析】

1、微生物常見的接種的方法

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

2、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學成分	根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學藥品反應，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

（1）該實驗的目的是篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌。按功能分，題目中的富集培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基需以淀粉為唯一的碳源。進行分離、純化培養(yǎng)時，要先將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，制成平板。此時所使用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，其中添加了一定量的瓊脂。從液體菌種到固體平板的過程及菌落生長均勻可推知，過程①②為稀釋涂布平板法。每毫升樣品中的細菌數(shù)約為50÷0.1×105=5×107個。

（2）培養(yǎng)基配置和滅菌時，培養(yǎng)基在滅菌前先進行調(diào)節(jié)pH值，對培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌處理。

（3）酶活力相同時，酶量越大，透明圈就越大，透明圈的大小可能由不同菌落產(chǎn)生的酶量不同導致，因此若菌落的大小大致相同，菌落發(fā)生的時間也相同，不能僅根據(jù)菌落周圍透明的大小來判斷該菌落所產(chǎn)生的淀粉酶單位酶量酶活力的高低。