Question

1．在植物抗病毒基因工程中，利用植物病毒復(fù)制酶基因是一種常見(jiàn)的方法，某實(shí)驗(yàn)小組將蕪菁花葉病毒復(fù)制酶（TuMV-Nib）反義基因?qū)�入大白菜中，�?jīng)檢測(cè)表明TuMV-Nib不僅整合到大白菜的染色體中，還獲得表達(dá)，而且轉(zhuǎn)基因植株的接種測(cè)試表明轉(zhuǎn)基因植株具有明顯的抗病性．TuMV-Nib反義基因的作用過(guò)程如圖所示，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）實(shí)驗(yàn)室大量擴(kuò)展TuMV-Nib反義基因常用的技術(shù)為PCR，該技術(shù)需要加入的原料是四種脫氧核糖核苷酸（或dATP、dTTP、dCTP、dGTP），利用該技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)不需要（填“需要”或“不需要”）知道該基因的全部堿基序列．
（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的常用方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，該方法常將目的基因?qū)�入Ti質(zhì)粒的T-DNA分子中，其原因是T-DNA能主動(dòng)轉(zhuǎn)移并整合到宿主細(xì)胞染色體的DNA分子中．分析圖示可知，TuMV-Nib反義基因主要通過(guò)影響圖中的②（填序號(hào)）過(guò)程，影響TuMV-Nib基因的表達(dá)．
（3）對(duì)已經(jīng)被病毒感染的植株，可選取該植株的莖尖通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗，利用莖尖作為材料的原因是莖尖很少或不會(huì)被病毒感染．

Answer 1

分析 分析題圖：圖中①為轉(zhuǎn)錄過(guò)程，②為翻譯過(guò)程；反義mRNA可以與mRNA互補(bǔ)配對(duì)形成雜交分子，這樣會(huì)阻礙基因表達(dá)的翻譯過(guò)程．

解答 解：（1）PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因；該技術(shù)需要加入的原料是四種脫氧核糖核苷酸（或dATP、dTTP、dCTP、dGTP）；利用該技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，只要有一段已知目的基因的核苷酸序以便于合成一對(duì)引物即可，不需要知道該基因的全部堿基序列．
（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上．分析圖示可知，TuMV-Nib反義基因轉(zhuǎn)錄形成的反義mRNA可與mRNA形成雜交分子，影響TuMV-Nib基因表達(dá)的②翻譯過(guò)程．
（3）對(duì)已經(jīng)被病毒感染的植株，可選取該植株的莖尖通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗，利用莖尖作為材料的原因是莖尖很少或不會(huì)被病毒感染．
故答案為：
（1）PCR    四種脫氧核糖核苷酸（或dATP、dTTP、dCTP、dGTP）   不需要
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法     T-DNA能主動(dòng)轉(zhuǎn)移并整合到宿主細(xì)胞染色體的DNA分子中   ②
（3）植物組織培養(yǎng)     莖尖很少或不會(huì)被病毒感染

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題．