Question

1．如圖是將人的生長激素基因?qū)�入�?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖，所用載體為質(zhì)粒A．已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒A導(dǎo)入細(xì)菌B后，其上的基因能否得到表達(dá)的探究：
（1）將目的基因和質(zhì)粒相結(jié)合形成重組質(zhì)粒（重組DNA分子）需要的工具為：限制酶和DNA連接酶．

（2）目前把重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞時(shí)，效率還不高；導(dǎo)入完成后得到的細(xì)菌，實(shí)際上有的根本沒有導(dǎo)入質(zhì)粒，有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒A，只有少數(shù)導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒．此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細(xì)菌是否導(dǎo)入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒：將得到的細(xì)菌涂抹在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的就是導(dǎo)入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的，反之則沒有．使用這種方法鑒別的原因是普通質(zhì)粒A和重組質(zhì)粒都含有抗氨芐青霉素基因．
（3）若把通過鑒定證明導(dǎo)入了普通質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的細(xì)菌放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，會(huì)發(fā)生的現(xiàn)象：有的能生長；有的不能生長．導(dǎo)入普通質(zhì)粒A的細(xì)菌能（能或不能）生長，因?yàn)橐蚱胀ㄙ|(zhì)粒A上有抗四環(huán)素基因；導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)菌不能（能或不能）生長，因?yàn)橐驗(yàn)槟康幕�因插在抗四環(huán)素基因中，使其結(jié)構(gòu)被破壞．
（4）導(dǎo)入細(xì)菌B細(xì)胞中的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是人的生長激素，受體細(xì)胞通過轉(zhuǎn)錄和翻譯過程形成這種蛋白質(zhì)．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示表示將人的生長激素基因?qū)�入�?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的過程．質(zhì)粒A上含有四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體后，破環(huán)了質(zhì)粒A的四環(huán)素抗性基因，但氨芐青霉素抗性基因正常，所以導(dǎo)入重組質(zhì)粒或普通質(zhì)粒的大腸桿菌都能抗氨芐青霉素，但導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能抗四環(huán)素．

解答 解：（1）將目的基因和質(zhì)粒相結(jié)合形成重組質(zhì)粒（重組DNA分子）：①用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)有黏性未端的切口；②用同種限制酶切割目的基因，產(chǎn)生相同的黏性未端；③將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處再加入適量的DNA連接酶，使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒．
（2）將得到的細(xì)菌涂布在一個(gè)含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，能夠生長的就是導(dǎo)入了普通質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒，反之則沒有．使用這種方法鑒別的原因是普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒均含有抗氨芐青霉素基因，其表達(dá)產(chǎn)物能分解青霉素．
（3）若把通過鑒定證明導(dǎo)入普通質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的細(xì)菌放在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，由于普通質(zhì)粒上有抗四環(huán)素基因，重組質(zhì)粒上的該基因由于目的基因的插入而被破壞，因此培養(yǎng)基中的細(xì)菌有的能生長，有的不能生長．
（4）基因成功表達(dá)的標(biāo)志是受體細(xì)胞通過轉(zhuǎn)錄和翻譯過程合成出相應(yīng)的蛋白質(zhì)，即人的生長激素．
故答案為：
（1）限制酶和DNA連接酶
（2）普通質(zhì)粒A和重組質(zhì)粒都含有抗氨芐青霉素基因
（3）能   因普通質(zhì)粒A上有抗四環(huán)素基因；不能．因?yàn)槟康幕�因插在抗四環(huán)素基因中，使其結(jié)構(gòu)被破壞
（4）人的生長激素

點(diǎn)評 本題結(jié)合“工程菌”的制造過程，考查基因工程的應(yīng)用，要求考生識記基因工程的基本操作步驟，能分析題圖，明確目的基因插入質(zhì)粒后會(huì)破壞質(zhì)粒的四環(huán)素抗性基因，再對選項(xiàng)作出準(zhǔn)確的判斷，屬于考綱識記和理解層次的考查．