Question

13．如圖為利用轉(zhuǎn)基因水稻大規(guī)模生產(chǎn)重組人血清白蛋白生產(chǎn)流程，圖中tet^R表示四環(huán)素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ為三種限制酶．下列相關(guān)分析中正確的是（　　）

• A． 基因工程的核心步驟是圖中③
• B． 在培養(yǎng)基中應(yīng)加入四環(huán)素篩選到含重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌
• C． 用HindⅢ、BamHⅠ雙酶切的目的是保證人血清白蛋白基因和質(zhì)粒的定向連接
• D． 檢測水稻胚乳細(xì)胞是否含有目的基因及其是否成功轉(zhuǎn)錄的方法都是DNA分子雜交法

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：A、基因工程的核心步驟是圖中②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，A錯(cuò)誤；
B、當(dāng)人血清白蛋白基因和質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒后，tet^R基因被人乳鐵蛋白基因隔開，不是完整的，而amp^R基因是完整的，所以篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行，B錯(cuò)誤；
C、外源DNA分子上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ的切割位點(diǎn)，其中限制酶SmaⅠ的切割位點(diǎn)位于目的基因上，所以獲取目的基因和構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)用限制酶HindⅢ和BamHⅠ，并且能保證人血清白蛋白基因和質(zhì)粒的定向連接，防止自身環(huán)化，C正確；
D、檢測水稻胚乳細(xì)胞是否含有目的基因用DNA分子雜交法，檢測其是否成功轉(zhuǎn)錄的方法是分子雜交法，D錯(cuò)誤．
故選：C．

點(diǎn)評 本題難度適中，屬于考綱中識記、理解層次的要求，著重考查了基因工程的步驟、目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法等相關(guān)知識，要求考生具有一定的識圖能力，并能識記相關(guān)基礎(chǔ)知識．