Question

【題目】為解決塑料袋造成的“白色污染”這一問題，某同學試圖從土壤中尋找一種能加速塑料袋自然降解過程的目的菌，以下是該同學從土壤中尋找并篩選目的菌的流程，請回答下列問題：

（1）對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是____________________。在接種前需要檢測使用的培養(yǎng)基是否被污染，方法是________________________。

（2）Ⅰ號培養(yǎng)基屬于________________（按功能分）培養(yǎng)基，其作用是使目的菌能“脫穎而出”。如圖采用的接種方法為________________。Ⅱ號培養(yǎng)基從物理性質來看，________（填“能”或“不能”）添加瓊脂。

（3）該同學在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為20.4，則每毫升樣品中的菌落數(shù)是________個。（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2mL）

（4）假設該同學發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上細菌數(shù)目過多而連成一片,說出一種可能的原因并提出合理的處理措施。原因:______________；措施:________________________________。

Answer 1

【答案】 高壓蒸汽滅菌法 將未接種的培養(yǎng)基在37℃（或適宜溫度）恒溫箱中倒置培養(yǎng)一段時間（或1～2天），觀察是否有菌落生成 選擇 稀釋涂布平板法 不能 1.02×106 菌液濃度過高（或稀釋倍數(shù)不夠）可以通過增大稀釋倍數(shù)解決（或原因：培養(yǎng)過程中被雜菌污染） 嚴格無菌操作程序

【解析】試題分析：本題主要考查微生物的分離和培養(yǎng)相關知識點，微生物這部分內容是高考試題的一個熱點一般體現(xiàn)在對生物工程中的應用，考查的知識點有微生物的無菌操作、微生物的分離以及產品的提取，注意總結。

（1）培養(yǎng)基常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。在接種前需要檢測使用的培養(yǎng)基是否被污染，可以將未接種的培養(yǎng)基在37℃（或適宜溫度）恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生成，若有菌落生成，則已經被污染，否則沒有被污染。
（2）要篩選能降解聚乙烯塑料的微生物，應選擇以聚乙烯塑料為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。圖Ⅱ號培養(yǎng)基上采用的接種方法為稀釋涂布平板法。Ⅱ號培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，因此不需要加凝固劑--瓊脂。
（3）根據題意可知，每克樣品中的菌落數(shù)=平板上菌落數(shù)的平均值÷體積×稀釋倍數(shù)=20.4÷0.2×104=1.02×106個。
（4）如果培養(yǎng)基上細菌數(shù)目過多連成一片，可能的原因是菌液濃度過高或操作過程不是無菌操作，還可能是接種時沒有把細菌分散開，采取的措施有：可以通過增大稀釋倍數(shù)解決（或培養(yǎng)過程中被雜菌污染；嚴格無菌操作程序。或利用接種針劃線時，劃下一個區(qū)域前沒有對接種針滅菌處理；每劃一個新的區(qū)域都要對接種針進行滅菌處理）。