Question

12．莠去津是一種含氮農(nóng)藥（化學(xué)名稱：2-氯-4-二乙胺基-6-異丙胺基-1，3，5-三嗪），在土壤中不易降解，為修復(fù)被其污染的土壤，可按下面程序選育能降解莠去津的細(xì)菌（目的菌）．請(qǐng)據(jù)圖回答：（已知莠去津在水中溶解度低，含過(guò)量莠去津的固體培養(yǎng)基不透明）

（1）由圖推斷，從A瓶到C瓶液體培養(yǎng)的過(guò)程稱為選擇培養(yǎng)，目的是初步選擇能降解莠去津的細(xì)菌（目的菌）并增加其數(shù)量．
（2）在將C瓶菌種接種到固體培養(yǎng)基之前通常要進(jìn)行梯度稀釋，從圖中看本實(shí)驗(yàn)將菌種接種到固體培養(yǎng)基的方法是稀釋涂布平板法．
（3）一段時(shí)間后，培養(yǎng)基出現(xiàn)無(wú)透明圈和有透明圈兩種菌落，我們篩選的目的菌是有透明圈菌落中的細(xì)菌，該菌落生長(zhǎng)所需的氮元素主要來(lái)源于莠去津．
（4）為弄清固體培養(yǎng)基中的非目的菌的菌落來(lái)自C瓶菌種還是培養(yǎng)基，應(yīng)如何設(shè)置對(duì)照組？配制的培養(yǎng)基滅菌后不接種菌種，與實(shí)驗(yàn)組放在相同條件下培養(yǎng)．
（5）某同學(xué)計(jì)劃統(tǒng)計(jì)C瓶中“目的菌”的總數(shù)，他選用10^-4稀釋液進(jìn)行涂布分離，且設(shè)置了3個(gè)培養(yǎng)皿的實(shí)驗(yàn)組．該同學(xué)得到的3個(gè)平板的菌落數(shù)分別是21、212和256，該同學(xué)以這3個(gè)平板上菌落平均數(shù)作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果．你認(rèn)為合理嗎？不合理．如何解釋3個(gè)平板上的數(shù)據(jù)差異？可能在操作過(guò)程中出現(xiàn)了錯(cuò)誤如某一組實(shí)驗(yàn)取菌液太少或涂布不均勻或涂布器未冷卻充分殺死了細(xì)菌（其他合理答案可給分）．
（6）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，除了菌種保存外，使用過(guò)的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散．

Answer 1

分析 1、從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株，其中選擇培養(yǎng)的目的是初步選擇能目的菌，并提高其密度．
2、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）據(jù)圖分析，從A瓶到C瓶液體培養(yǎng)的過(guò)程稱為選擇培養(yǎng)，目的是初步選擇能降解莠去津的細(xì)菌（目的菌），并提高其密度．
（2）在將C瓶菌種接種到固體培養(yǎng)基之前通常要進(jìn)行梯度稀釋，據(jù)圖分析，本實(shí)驗(yàn)采用的接種方法是稀釋涂布平板法．
（3）目的菌可以降解培養(yǎng)基中的莠去津作為唯一氮源，并形成有透明帶的菌落．
（4）本實(shí)驗(yàn)的對(duì)照組應(yīng)該為配置的培養(yǎng)基滅菌后不接種，與實(shí)驗(yàn)組放在相同條件下培養(yǎng)．
（5）該同學(xué)得到的3個(gè)平板的菌落數(shù)分別是21、212和256，其中有一個(gè)平板的數(shù)據(jù)與其他兩個(gè)相差較大，因此該同學(xué)以這3個(gè)平板上菌落平均數(shù)作為統(tǒng)計(jì)結(jié)果不合理．這3個(gè)平板上的數(shù)據(jù)差異產(chǎn)生的原因可能是：在操作過(guò)程中出現(xiàn)了錯(cuò)誤如某一組實(shí)驗(yàn)取菌液太少或涂布不均勻或涂布器未冷卻充分殺死了細(xì)菌．
（6）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，除了菌種保存外，使用過(guò)的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過(guò)滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散．
故答案為：
（1）選擇培養(yǎng)　初步選擇能降解莠去津的細(xì)菌（目的菌）并增加其數(shù)量
（2）梯度稀釋　稀釋涂布平板
（3）有透明圈　莠去津
（4）配制的培養(yǎng)基滅菌后不接種菌種，與實(shí)驗(yàn)組放在相同條件下培養(yǎng)
（5）不合理   可能在操作過(guò)程中出現(xiàn)了錯(cuò)誤如某一組實(shí)驗(yàn)取菌液太少或涂布不均勻或涂布器未冷卻充分殺死了細(xì)菌（其他合理答案可給分）
（6）滅菌

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查微生物的篩選分離過(guò)程，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)微生物的分離過(guò)程的認(rèn)識(shí)和實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程的要求．