Question

酶解法制備原生質體的原理是利用酶溶液對細胞壁成分的降解作用。蝸牛酶液從蝸牛(以植物為食)消化腺中提取;果膠酶、纖維素酶從微生物中提取。為了研究不同酶液的酶解效果,某實驗小組取無菌煙草幼葉,切成相同大小的小片,等量放入6支試管中,試劑用量和實驗結果列于下表。請回答有關問題。

試管編號 項目	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	Ⅴ	Ⅵ
蒸餾水(mL)	2	0	1	1	1	1
緩沖液(mL)	0	2	1	0.5	0.5	0.5
果膠酶液(mL)	0	0	0	0.5	0	0
蝸牛酶液(mL)	0	0	0	0	0.5	0
纖維素酶液(mL)	0	0	0	0	0	0.5
實驗結果 (綠色深淺程度)	-	-	-	+++	++++	++

(注:“+”越多表示綠色越深,“-”表示顏色無顯著變化)

(1)實驗過程中,需要輕搖試管,其目的是 ,使原生質體從葉小片中游離出來,以便觀察懸浮液綠色的深淺。

(2)從綠色的深淺可推測:蝸牛酶液酶解效果最好,原因是蝸牛酶液含有 等多種酶。該實驗中 是空白對照組,其設置意義是 。

(3)用網篩過濾原生質體到離心管內,離心后收集沉淀物,并用 洗滌。

(4)原生質體是否符合要求還需進行檢驗,其檢驗的方法是 。

 

Answer 1

(1)為了使細胞壁與酶充分接觸,提高酶解效果

(2)果膠酶和纖維素酶 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 排除無關變量的干擾

(3)等滲溶液 (4)低滲漲破法

【解析】本題考查了酶的作用實驗的設計及操作。(1)實驗過程中,需要輕搖試管,可以使細胞壁與酶充分接觸,提高酶解效果。(2)蝸牛以植物為食,所以蝸牛酶液中含有果膠酶和纖維素酶,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ沒有添加酶溶液為空白對照組,其設置意義是排除無關變量的干擾。(3)離心后收集沉淀物,并用等滲溶液清洗,目的是保持細胞正常形態(tài)。(4)要用低滲漲破法來檢驗原生質體是否符合要求,若沒有細胞壁則可以漲破,有則不能漲破。