Question

12．蘋果干腐病是一種名為茶藤子葡萄座腔菌真菌引起的疾病，病菌通常由枝條傷口入侵感染，在傷口處形成潰瘍．某中學(xué)的科研小組計(jì)劃分離出該真菌，并進(jìn)行藥物防治實(shí)驗(yàn)，為蘋果干腐病的防治提供合理的建議．經(jīng)過查閱資料，確定了分離時(shí)所用的PDA培養(yǎng)基配方，如表所示：

物質(zhì)	馬鈴薯	葡萄糖	自來水	氯霉素
含量	200g	20g	1000mL	0.3g

該真菌在上述PDA培養(yǎng)基上生長時(shí)有特定的形態(tài)特征：輻射狀白色匍匐菌絲，絨毛狀．
（1）要獲得菌落，則上表中還應(yīng)添加的成分是瓊脂（或凝固劑）．氯霉素的作用是抑制細(xì)菌等雜菌的生長．培養(yǎng)基的制備步驟包括計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板．等平板冷卻凝固后，將平板倒置放置，以防止冷凝水污染培養(yǎng)基．
（2）用剪刀從染病枝條潰瘍處剪取1×1cm²的患病組織，并用0.1%的升汞進(jìn)行消毒，置于培養(yǎng)基中心，在合適條件下進(jìn)行培養(yǎng)，共培養(yǎng)五組．待菌落形態(tài)特征穩(wěn)定后，用平板劃線法將該致病菌分別轉(zhuǎn)移至含有等量0.5%苦水堿劑、40%福美砷、清水的上述PDA培養(yǎng)基中進(jìn)行抗藥性實(shí)驗(yàn)，并每隔24h記錄一次最后劃線區(qū)域的菌落數(shù)目．
①選取菌落數(shù)目穩(wěn)定的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏的菌落數(shù)目．
②記錄結(jié)果如下：

小組	0.5%苦水堿劑	40%福美砷	清水
菌落數(shù)目	2	8	17

從結(jié)果分析可知，0.5%苦水堿劑能很好的抑制該真菌的生長，適合防治蘋果干腐�。�

Answer 1

分析 微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．一般固體培養(yǎng)基中會(huì)加入瓊脂作為凝固劑．
分析表格物質(zhì)，氯霉素能夠抑制細(xì)菌的生長，而真菌可以生存．

解答 解：（1）根據(jù)表格中培養(yǎng)基成分可知，培養(yǎng)基中加入氯霉素，氯霉素能夠抑制雜菌生長，因此該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，而選擇培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基需要加入瓊脂作為凝固劑．培養(yǎng)基的制備步驟包括計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板．等平板冷卻凝固后，將平板倒置放置，以防止冷凝水污染培養(yǎng)基．
（2）根據(jù)題干信息“每隔24h記錄一次最后劃線區(qū)域的菌落數(shù)目”，因此分離微生物的方法為平板劃線法．
①選取菌落數(shù)目穩(wěn)定的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏的菌落數(shù)目．
②分析表格數(shù)據(jù)可知，0.5%苦水堿劑作用后菌落數(shù)最少，因此0.5%苦水堿劑能很好的抑制該真菌的生長，適合防治蘋果干腐�。�
故答案為：
（1）瓊脂（或凝固劑）    抑制細(xì)菌等雜菌的生長    滅菌    倒置放置
（2）平板劃線     ①菌落數(shù)目穩(wěn)定      ②0.5%苦水堿劑

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離和培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠掌握培養(yǎng)基的成分以及制作步驟，能夠根據(jù)題干以及表格信息準(zhǔn)確答題．