Question

12．秸稈還田技術(shù)既是減少秸稈焚燒的重要措施，也是農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的戰(zhàn)略抉擇．某校生物興趣小組研究發(fā)現(xiàn)，秸稈還田的過程中施加外源纖維素酶能起到較好的效果．請(qǐng)回答下列問題：
（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C₁酶、C_X酶和葡萄糖苷酶三種，其中能夠?qū)⒗w維二糖分解為葡萄糖的是葡萄糖苷酶．
（2）自然界中纖維素分解菌大多分布在富含纖維素的環(huán)境中．從該環(huán)境取回的土樣中含有多種微生物，該興趣小組可在培養(yǎng)基中加入剛果紅來幫助篩選纖維素分解菌．若右圖為培養(yǎng)結(jié)果，應(yīng)選擇的菌株為菌Ⅲ（填“菌Ⅰ”“菌Ⅱ”或“菌Ⅲ”）．
（3）對(duì)篩選得到的微生物還需進(jìn)一步純化培養(yǎng)以增加菌種的數(shù)量，為方便后續(xù)的計(jì)數(shù)，宜采用的純化方法是稀釋涂布平板法．
（4）為了確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生纖維素酶的實(shí)驗(yàn)．利用纖維素酶能催化纖維素分解為還原性的葡萄糖這一特性，可利用斐林試劑判斷微生物提取物是否起到了降解纖維素的作用．

Answer 1

分析 1、微生物常見的接種的方法（其中稀釋涂布平板法還可以用于微生物的計(jì)數(shù)）
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．
2、分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)的原理：
①土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶．纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長(zhǎng)，其他微生物則不能生長(zhǎng)．
②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌．

解答 解：（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C₁酶、C_X酶和葡萄糖苷酶三種，其中能夠?qū)⒗w維二糖分解為葡萄糖的是葡萄糖苷酶．
（2）自然界中纖維素分解菌大多分布在富含纖維素的環(huán)境中．在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌．透明圈越大，說明該菌分解纖維素的能力越強(qiáng)，因此應(yīng)選擇的菌Ⅲ．
（3）接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中稀釋涂布平板法還可以用于微生物的計(jì)數(shù)．因此，為方便后續(xù)的計(jì)數(shù)，宜采用的純化方法是稀釋涂布平板法．
（4）為了確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生纖維素酶的實(shí)驗(yàn)．還原糖可用斐林試劑進(jìn)行鑒定，因此利用纖維素酶能催化纖維素分解為還原性的葡萄糖這一特性，可利用斐林試劑判斷微生物提取物是否起到了降解纖維素的作用．
故答案為：
（1）復(fù)合      葡萄糖苷酶
（2）富含纖維素     剛果紅    菌Ⅲ
（3）稀釋涂布平板法
（4）發(fā)酵產(chǎn)生纖維素酶    斐林

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記接種微生物常用的兩種方法；掌握微生物的計(jì)數(shù)方法；識(shí)記分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)的原理，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題．