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(1)進行過程①時，需用______ 酶切開載體以插入let-7基因。載體應有RNA聚合酶識別和結合的部位，以驅動let-7基因轉錄，該部位稱為_________。
(2)進行過程e時，需用________酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細胞，以利于傳代培養(yǎng)。
(3)研究發(fā)現(xiàn)，如let-7基因能影響癌基因RAS的表達，其影響機理如圖2。據(jù)圖分析，可從細胞中提取_______進行分子雜交，以直接檢測let-7基因是否轉錄。肺癌細胞增殖受到抑制，可能是由于細胞中_________(RASmRNA/RAS蛋白質)含最減少引起的。

(1)過程①酶作用的部位是                鍵，此過程只發(fā)生在非結合區(qū)DNA，過程②酶作用的部位是                鍵。
(2)①、②兩過程利用了酶的                 特性。
(3)若將得到的DNA片段用于構建重組質粒，需要過程③的測序結果與           酶的識別序列進行對比，已確定選用何種酶。
(4)如果復合體中的蛋白質為RNA酶聚合，則其識別、結合DNA序列位基因的                  。
(5)以下研究利用了生物分子間的特異性結合的有              (多選)
A．分離得到核糖體，用蛋白酶酶解后提rRNA
B．用無水乙醇處理菠菜葉片，提取葉綠體基粒膜上的光合色素
C．通過分子雜交手段，用熒光物質標記的目的基因進行染色體定位
D．將抑制成熟基因導入番茄，其mRNA與催化成熟酶基因的mRNA互補結合，終止后者翻譯，延遲果實成熟。

A．提取矮牽牛藍色花的mRNA，經(jīng)逆轉錄獲得互補的DNA，再擴增基因B
B．利用限制性核酸內切酶從開藍色花矮牽牛的基因文庫中獲取基因B
C．利用DNA聚合酶將基因B與質粒連接后導入玫瑰細胞
D．將基因B直接導入大腸桿菌，然后感染并轉入玫瑰細胞

A．分子雜交技術
B．抗原—抗體雜交
C．抗蟲或抗病的接種實驗
D．基因槍法

A．HindⅢ2個，BamHⅠ1個
B．HindⅢ2個，BamHⅠ3個
C．HindⅢ和BamHⅠ各有2個 　
D．HindⅢ1個，BamHⅠ2個

A．a(chǎn)的基本骨架是磷酸和核糖交替連接而成的結構
B．要獲得相同的黏性末端，可以用不同種b切割a和d
C．c連接雙鏈間的A和T，使黏性末端處堿基互補配對
D．若要獲得未知序列的d，可到基因庫中尋找

(1)將含有目的基因的DNA與質粒該表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有__________、_________、__________三種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質粒，需要對這些連接產(chǎn)物進行_____________。
(2)用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是_____________；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物____________。
(3)目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結合的位點是__________，其合成的產(chǎn)物是____________。
(4)在上述實驗中，為了防止目的基因和基因和質粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應選用的酶是_____________。

A．該質粒分子是由四種堿基組成
B．構建該表達載體的工具酶是限制酶和耐高溫DNA聚合酶
C．本實驗應采用GeneⅡ作為載體的標記基因
D．質粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

(1)該實驗設計主要體現(xiàn)了__________________原則。
(2)由實驗可知，在這段已知序列上，A酶與B酶的識別序列分別為______個和_____個。
(3)根據(jù)表中數(shù)據(jù)，請在下圖中標出相應限制性酶的酶切位點并注明相關片斷的大小。

(4)已知BamH Ⅰ與BglⅡ的識別序列及切割位點如下圖所示，用這兩種酶和DNA連接酶對一段含有數(shù)個BamH Ⅰ和BglⅡ識別序列的DNA分子進行反復的切割、連接操作，若干循環(huán)后“AGATCC//TCTAGG”和______________序列明顯增多。

(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由___________連接。
(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段，產(chǎn)生的末端是___________末端，其產(chǎn)物長度為____________。
(3)若圖1中虛線方框內的堿基對被T－A堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛�因d。從雜合子分離出圖1及其對應的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，產(chǎn)物中共有___________種不同DNA片段。
(4)若將圖2中質粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行，形成重組質粒，那么應選用的限制酶是____________。在導入重組質粒后，為了篩選出含重組質粒的大腸桿菌，一般需要用添加__________的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。經(jīng)檢測，部分含有重組質粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達，其最可能的原因是____________。