熒光素酶（Luciferase）是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱．熒光素酶及其合成基因在生物研究中有著廣泛的利用．
（1）熒光素酶基因常被作為基因工程中的標(biāo)記基因，一個(gè)完整的基因表達(dá)載體除了目的基因、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)外，還應(yīng)包括．
（2）下表為4種限制酶的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)，圖1為含有熒光素酶基因的DNA片段及其具有的限制酶切點(diǎn)．若需利用酶切法獲得熒光素酶基因，最應(yīng)選擇的限制酶是．

限制酶	MspⅠ	BamHⅠ	MboⅠ	SmaⅠ
酶切 位點(diǎn)	C↓CGG GGC↑C	G↓GATCC CCTAG↑G	↓GATC CTAG↑	CCC↓GGG GGG↑CCC

（3）熒光素酶在ATP的參與下，可使熒光素發(fā)出熒光．生物學(xué)研究中常利用“熒光素-熒光素酶發(fā)光法”來測(cè)定樣品中ATP的含量．某研究小組對(duì)“測(cè)定ATP時(shí)所需熒光素酶溶液的最佳濃度”進(jìn)行了探究．
【實(shí)驗(yàn)材料】1×10^-8 mol/L ATP標(biāo)準(zhǔn)液、緩沖溶液、70mg/L熒光素溶液（過量）、濃度分別為10、20、30、40、50、60、70mg/L的熒光素酶溶液．
【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】見圖2．
【實(shí)驗(yàn)分析與結(jié)論】
①實(shí)驗(yàn)材料中緩沖溶液的作用是．
為使結(jié)果更加科學(xué)準(zhǔn)確，應(yīng)增設(shè)一組濃度為的熒光素酶溶液作為對(duì)照．除題目已涉及的之外，還需要嚴(yán)格控制的無關(guān)變量有（至少寫出一個(gè)）．
②由圖2可知，點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的熒光素酶濃度為最佳濃度．e、f、g點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的熒光素酶濃度不同，但發(fā)光強(qiáng)度相同，其主要原因是．
（4）食品衛(wèi)生檢驗(yàn)中，可利用上述方法測(cè)定樣品中細(xì)菌的ATP總含量，進(jìn)而測(cè)算出細(xì)菌的數(shù)量，判斷食品污染程度．測(cè)算的前提是每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞中ATP的含量．

回答有關(guān)實(shí)驗(yàn)探究的問題
在光合作用的研究過程中，有科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，當(dāng)綠色植物和藻類在較長(zhǎng)波長(zhǎng)的光（如680nm）和較短波長(zhǎng)的光（如660nm）下進(jìn)行光合作用時(shí)，比只用白光的光能效率低得多．某同學(xué)設(shè)計(jì)如下的實(shí)驗(yàn)，探究這二種波長(zhǎng)的光是否有光合成的增進(jìn)效應(yīng)（是指兩種不同波長(zhǎng)的光組合在一起作用時(shí)，光合成就以高效率進(jìn)行，其效率比一種光單獨(dú)起作用的效率之和大得多的現(xiàn)象）
I、實(shí)驗(yàn)步驟：
①生長(zhǎng)狀況相同的豌豆幼苗若干，平均分成兩組．
②將各組豌豆放入如A、B的實(shí)驗(yàn)裝置中（如圖），在其余條件相同情況下進(jìn)行培養(yǎng)．

③實(shí)驗(yàn)開始時(shí)調(diào)節(jié)水滴X、Y的位置，并作記錄，每隔2h，測(cè)量水滴位置一次，8h后，實(shí)驗(yàn)結(jié)束，計(jì)算A、B實(shí)驗(yàn)裝置中水滴移動(dòng)的距離（mm）．
II、實(shí)驗(yàn)結(jié)果（見圖C曲線）
（1）以上實(shí)驗(yàn)?zāi)芊駵?zhǔn)確說明不同波長(zhǎng)的光具有光合成的增進(jìn)效應(yīng)？．
其原因是．
（2）請(qǐng)完善上述實(shí)驗(yàn)，寫出你補(bǔ)充的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，并預(yù)測(cè)整個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果．
①應(yīng)補(bǔ)充的實(shí)驗(yàn)：
第一步：再取生長(zhǎng)狀況相同的豌豆幼苗若干
第二步：
第三步：
②預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：（請(qǐng)將預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果用曲線在答題紙的圖中表示）
實(shí)驗(yàn)結(jié)論：．
（3）請(qǐng)給本實(shí)驗(yàn)確定一個(gè)課題名稱
（4）本實(shí)驗(yàn)中的控制變量有（至少寫兩個(gè)）

血糖濃度保持平衡對(duì)機(jī)體生命活動(dòng)具有重要作用．下圖為胰島素作用機(jī)理模式圖．

（1）胰島素首先與細(xì)胞膜上受體結(jié)合，不能通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，可推測(cè)胰島素不屬于（填“蛋白質(zhì)”、“脂質(zhì)”）物質(zhì)’而且據(jù)上圖可推測(cè)胰島素和葡萄糖（填“是”、“不是”）內(nèi)環(huán)境的成分，除上圖體現(xiàn)的膜島素作用之外，胰島素的夜雨還表現(xiàn)在能促進(jìn)，同時(shí)抑制非糖物質(zhì)（脂肪、蛋白質(zhì)）轉(zhuǎn)化為葡萄糖
（2）某人因體內(nèi)含有胰島素的抗體而表現(xiàn)出髙血糖癥狀，此抗體是由相應(yīng)的分泌的，若給其注射胰島素 （填“能，不能”）有效調(diào)節(jié)其血糖水平，原因是．推測(cè)治療此種血糖髙6方法之一是
（3）影響胰島素分泌的主要因素是，此因素不但可直接刺激胰島B細(xì)胞，此外也作用于血管內(nèi)的感受器，反射性地引_島素分泌．因此血糖平衡受的調(diào)節(jié)．

人乳頭病毒（HPV）是一種DNA病毒，可誘發(fā)人體細(xì)胞癌變，目前，科技人員正千方百計(jì)地研究HPV疫苗，以有效預(yù)防某些類型的癌癥．以下是兩種研發(fā)疫苗的思路：

（1）人體細(xì)胞感染HPV發(fā)生癌變后．由于細(xì)胞的發(fā)生改變，因此可以通過顯微鏡觀察將其與正常細(xì)胞區(qū)分開來．
（2）獲取HPV的抗原基因后．在對(duì)其進(jìn)行人工擴(kuò)拉時(shí)，肯定需要酶
（3）圖解中的①過程包括兩個(gè)步驟，依次是和
（4）HPV抗原基因在人體細(xì)的和轉(zhuǎn)基因細(xì)菌中的表達(dá)過程是相同的，都可以圖解表示：
（5）初次受HPV抗原刺激后，人體內(nèi)增殖的免疫細(xì)胞有．清除上述方法Ⅰ產(chǎn)生的HPV抗原，需要依靠免疫．
（6）通過上述方法Ⅰ和方法Ⅱ接種疫苗后，人體血糖中特異性抗體嘗試的變化趨勢(shì)分別最可能是圖2中的．

請(qǐng)回答與生態(tài)調(diào)查相關(guān)的問題：
（1）某湖泊的水域主要分為河蟹網(wǎng)圍養(yǎng)殖區(qū)及航道區(qū)，養(yǎng)殖的河蟹主要以沉水植物為食．研究人員對(duì)養(yǎng)殖區(qū)及航道區(qū)水生植物群落和水環(huán)境狀況進(jìn)行了調(diào)查，調(diào)查結(jié)果如下表：

水生植物 種類		漂浮植物		浮葉植物		沉水植物
湖泊   采樣區(qū)域		紫背 浮萍	水鱉	菱	荇菜	金魚藻	穗花 狐尾藻	苦草	馬來 眼子菜	輪葉 黑藻	伊樂藻
采	養(yǎng)殖區(qū)1	+	+			++	++				++
樣	養(yǎng)殖區(qū)2	+	+			++	++				++
點(diǎn)	航道區(qū)1					++	+	++	+	+	+
	航道區(qū)2			+	+	+	+	++	++	+	+

注：+表示出現(xiàn)，++表示優(yōu)勢(shì)種
①?gòu)恼{(diào)查結(jié)果看，該湖泊水生植物群落存在明顯的結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)有利于植物充分利用光能等環(huán)境資源．
②除植物本身的生活習(xí)性外，造成養(yǎng)殖區(qū)與航道區(qū)優(yōu)勢(shì)種類型有差異的主要原因是．
③在夏季，航道區(qū)的苦草迅速繁殖達(dá)到最大量時(shí)可占湖泊中總生物量的60%以上，它所制造的有機(jī)物可用于細(xì)胞呼吸消耗、、被分解者利用等方面．除人為捕撈外，此湖泊大型肉食性魚類數(shù)量稀少的主要原因是，導(dǎo)致高營(yíng)養(yǎng)級(jí)生物獲得能量少．
（2）研究人員調(diào)查了生態(tài)果園中某些昆蟲的密度，結(jié)果如下表所示．

	害蟲		害蟲天敵
昆蟲種類	蚜蟲 （頭/枝）	雌成螨 （頭/葉）	小花蝽 （頭/枝）	瓢蟲 （頭/枝）	食蚜盲蝽 （頭/枝）
昆蟲密度	39.3	0.34	0.47	0.29	0.33

①兩種害蟲與三種害蟲天敵屬于不同種類，它們之間的差異屬于多樣性．
②果園中存在復(fù)雜的捕食關(guān)系，維持了果園的生態(tài)穩(wěn)定，請(qǐng)根據(jù)調(diào)查情況寫出其中的一條食物鏈：．
③當(dāng)果園里蚜蟲的數(shù)量增多時(shí)，瓢蟲的數(shù)量也會(huì)增多，這樣蚜蟲數(shù)量的增長(zhǎng)就會(huì)受到抑制，這屬于生物群落內(nèi)的調(diào)節(jié)．

利用轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺生物發(fā)應(yīng)器生產(chǎn)人的生長(zhǎng)激素，需要構(gòu)建一種能高水平表達(dá)的表達(dá)載體，選擇合適的基因啟動(dòng)子至關(guān)重要．由于無法由基因表達(dá)產(chǎn)物推知啟動(dòng)子的堿基序列，運(yùn)用PCR技術(shù)單獨(dú)克隆啟動(dòng)子存在困難．科研人員經(jīng)過長(zhǎng)期研究，終于發(fā)明了下圖所示的一種克隆啟動(dòng)子的方法．請(qǐng)回答：

（1）培育轉(zhuǎn)基因奶牛時(shí)，需要在生長(zhǎng)激素編碼序列前插入的啟動(dòng)子．
（2）由基因表達(dá)產(chǎn)物無法推知啟動(dòng)子堿基序列，其原因是．
（3）過程①需選擇的限制酶是，過程③需選擇的限制酶是．過程④需要使用的工具酶是．
（4）過程④中可以根據(jù)基因編碼序列兩端的部分堿基序列設(shè)計(jì)進(jìn)行擴(kuò)增．?dāng)U增過程中，在第輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段．
（5）過程⑤中將克隆的啟動(dòng)子與外源基因編碼序列連接時(shí)，原引物a所在的P片段的堿基對(duì)數(shù)目應(yīng)是3的整數(shù)倍，目的是．

為了提高溫室的經(jīng)濟(jì)效益，需要調(diào)控好溫室內(nèi)的光照、溫度、氣體和濕度．科研人員對(duì)溫室栽種的作物進(jìn)行了相關(guān)研究，以下是實(shí)驗(yàn)測(cè)得的有關(guān)數(shù)據(jù)．甲表所示為特殊的裝置內(nèi)，給予不同強(qiáng)度的光照，測(cè)到的該植物的氧氣釋放量．乙圖表示該作物相對(duì)光合速率（即凈光合速率）與葉齡的關(guān)系，A點(diǎn)表示幼葉成折疊狀，B點(diǎn)表示葉片充分展開，丙圖中曲線1、2分別表示作物在適宜的光照強(qiáng)度下的實(shí)際光合量和凈光合量．
表甲

光照強(qiáng)度（klux）	0	2	4	6	8	10	12	14
02釋放量 （uL/cm2葉面?min）	-0.2	O	O.2	0.4	0.8	1.2	1.2	1.2

根據(jù)上述有關(guān)數(shù)據(jù)，回答下列有關(guān)問題：
（1）從甲表可知，在光照強(qiáng)度為4千勒克斯時(shí)，該作物光合作用的實(shí)際產(chǎn)氧量為uL/cm²葉面?min．
（2）由乙圖分析：
①新形成的嫩葉凈光合速率（凈光合速率═實(shí)際光合速率一呼吸速率）較低，從光合作用光反應(yīng)角度分析是由于；．
②CD段相對(duì)光合速率明顯下降的原因是，．
（3）由丙圖分析：假如植物生活在12小時(shí)光照，12小時(shí)黑暗的環(huán)境中，則在環(huán)境溫度達(dá)到約時(shí)，該植物就不能正常增長(zhǎng)．

生物--選修3現(xiàn)代生物科技專題
下面是畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法，請(qǐng)分析回答：

（1）方法Ⅰ和方法Ⅱ均用到的生物技術(shù)有和．
（2）用激素處理的目的是使B牛，從B牛體內(nèi)獲得的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到（時(shí)期）才能與精子結(jié)合．
（3）A牛的精子必須在B牛的生殖道中經(jīng)過相應(yīng)的生理變化后，才能與B牛的卵細(xì)胞結(jié)合，完成受精作用，這個(gè)過程叫．卵子受精的標(biāo)志是在卵黃膜和透明帶的間隙能夠觀察到．
（4）生產(chǎn)上常用期的胚胎進(jìn)行胚胎移植．若希望同時(shí)獲得多個(gè)性狀相同的家畜個(gè)體，可以使用技術(shù)．

如圖為渤海生態(tài)系統(tǒng)簡(jiǎn)化食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：
（1）圖示生態(tài)系統(tǒng)中處于第二營(yíng)養(yǎng)級(jí)的生物類群有．圖示中未包括生態(tài)系統(tǒng)的和成分．
（2）若游泳運(yùn)動(dòng)食性魚類的食物

1

2

來自浮游動(dòng)物食性魚類，

1

4

來自是蟹類，

1

4

來自底棲動(dòng)物食性魚類，則游泳運(yùn)動(dòng)食性魚類的能量每增加100KJ．浮游植物提供的能量至少為KJ．
（3）圖中相鄰物種的某些個(gè)體行為與種群特征為對(duì)方提供了大量的有用信息，影響著他們之間的捕食行為，這說明信息傳遞在生態(tài)系統(tǒng)中的作用是．
（4）近些年，由于人們的過度捕撈和環(huán)境污染，導(dǎo)致海洋生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性減弱，海洋生態(tài)環(huán)境急劇惡化．為此，請(qǐng)你提出針對(duì)性的保護(hù)措施．

回答下列光合作用和呼吸作用的問題．
圖甲表示在光照充足、CO₂濃度適宜的條件下，溫度對(duì)某植物的真正光合作用速率和呼吸作用速率的影響．圖中實(shí)線表示光合作用速率，虛線表示呼吸作用速率．

（1）分析圖甲知，光合作用、呼吸作用都受到溫度的影響，其中與作用有關(guān)的酶對(duì)高溫更為敏感．
（2）若晝夜不停地光照，該植物生長(zhǎng)的最適宜溫度約是；若溫度均保持在20℃的條件下，長(zhǎng)時(shí)間每天交替進(jìn)行12h光照、12h黑暗，該植物能否正常生長(zhǎng)？．理由是．
（3）在溫度為10℃的條件下，該植物葉肉細(xì)胞中產(chǎn)生ATP的場(chǎng)所有．
（4）根據(jù)圖甲，在圖乙的坐標(biāo)上畫出植物在15～60℃范圍內(nèi)凈光合作用速率的變化曲線．
（5）圖丙表示A、B兩種植物的光照等條件適宜的情況下，光  合作用強(qiáng)度對(duì)環(huán)境中CO₂濃度變化的適應(yīng)性．若將上述2種植物幼苗置于同一密閉的玻璃罩中，則一段時(shí)間內(nèi)，生長(zhǎng)首先受影響的植物是，原因是
（6）在一定的CO₂濃度和適宜溫度下，把某植物葉片置于5千勒克司（此時(shí)測(cè)得光合速率為吸收CO₂45.0mg/100cm²葉?小時(shí)）光照下14小時(shí)，其余時(shí)間置于黑暗中（呼吸作用速率為 7.0mgCO₂/100cm²葉?小時(shí)），則1天內(nèi)該植物每50cm²葉片葡萄糖積累量為mg．