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9.某同學(xué)欲獲得純凈的細胞膜,以研究其結(jié)構(gòu)與功能.請你設(shè)計一個簡易的實驗:
(1)選取人體的A(A.成熟紅細胞 B.口腔上皮細胞 C.白細胞)作為獲取細胞膜純凈物的來源,是因為沒有細胞核和具膜結(jié)構(gòu)的細胞器.
(2)將選取的上述材料放入試管中,然后加入清水,由于滲透作用,一段時間后細胞將破裂,再用離心法獲得純凈的細胞膜,上清液中含量最多的有機物是血紅蛋白.

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8.為了得到普洱茶中產(chǎn)蛋白酶的微生物,研究人員進行了一系列篩選、檢測.
(1)研究人員稱取普洱茶1g,加入99mL無菌水,制備稀釋102倍的茶葉水.再將茶葉水進行梯度稀釋,獲得A103、104、105倍的稀釋茶葉水.取100μL稀釋茶葉水,用(稀釋)涂布法接種到奶粉培養(yǎng)基,37℃條件下培養(yǎng)4-5天,在培養(yǎng)基中選擇菌落周圍的透明圈(或“水解圈”)較大的菌株作為目的菌株.
(2)將獲得的多個目的菌株接種于液體茶湯培養(yǎng)基中培養(yǎng).已知氨基酸都能夠和茚三酮反應(yīng)生成藍紫色物質(zhì),因此可以利用分光光度計測定茶湯中游離氨基酸的量.先用已知濃度的氨基酸溶液測定結(jié)果繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,再分別測定培養(yǎng)每個菌株的液體茶湯培養(yǎng)基的吸光值,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較,計算出該茶湯中游離氨基酸的量,氨基酸含量高的,即為蛋白酶產(chǎn)生量高的菌株.該實驗中應(yīng)測定不接種(或“接種滅活菌株”)的液體茶湯培養(yǎng)基的游離氨基酸含量,作為對照組的數(shù)據(jù).

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7.表皮生長因子受體(EGFR)在某些癌細胞表面明顯增多,針對EGFR的靶向治療越來越受到研究者的關(guān)注.
(1)研究者提取了癌細胞表面的EGFR,并注射到小鼠體內(nèi).一段時間后,取小鼠的脾臟組織,剪碎后用胰蛋白酶使其分散成單個細胞.將得到的脾臟細胞與骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合后,依次通過選擇培養(yǎng)基篩選和抗體陽性(或“抗原-抗體雜交”)檢測,篩選得到所需的雜交瘤細胞,并從細胞培養(yǎng)液中獲得待測單克隆抗體.
(2)研究者將待測單克隆抗體作為抗原注射到異種動物體內(nèi)進行免疫,制備出抗EGFR單克隆抗體的抗體,然后將辣根過氧化物酶與該抗體結(jié)合,制備出酶標(biāo)記抗體.將EGFR結(jié)合到固相載體上,加入待測的單克隆抗體,再將酶標(biāo)記抗體加入反應(yīng)體系.然后向反應(yīng)體系中加入白色底物(可被辣根過氧化物酶催化形成藍色產(chǎn)物),反應(yīng)體系中藍色的深淺可以反映出待測單克隆抗體的含量.
(3)研究者分析所制備單克隆抗體的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),設(shè)計新的氨基酸序列,通過分子生物學(xué)的手段對控制合成該抗體的基因進行修飾改造,從而解決鼠源抗體在人體內(nèi)的免疫排斥問題.研究者要利用大腸桿菌來表達新的單克隆抗體,降低生產(chǎn)成本,還需要解決抗體在大腸桿菌細胞內(nèi)翻譯后無法正確加工的問題.

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6.科研人員利用野生型二倍體馬鈴薯(2n=24)和抗青枯病的二倍體茄子(2n=24)進行體細胞雜交,培育抗青枯病馬鈴薯.
(1)自然界中馬鈴薯和茄子間存在生殖隔離,難以通過有性生殖產(chǎn)生后代.
(2)科研人員將馬鈴薯和茄子的葉片用纖維素酶和果膠酶分解處理,獲得有活力的原生質(zhì)體.將馬鈴薯和茄子的原生質(zhì)體融合,融合細胞在培養(yǎng)基中培養(yǎng),培養(yǎng)基中需要加入(一定濃度的)植物激素,促進形成愈傷組織和再分化形成雜種植株.
(3)科研人員從PCR鑒定為陽性的雜種植株中選出雜種植株B,用流式細胞儀進一步測定二倍體馬鈴薯、二倍體茄子和雜種植株B的DNA相對含量結(jié)果如圖.

依據(jù)上述結(jié)果預(yù)測,馬鈴薯-茄子四倍體融合細胞的DNA相對含量約為125.據(jù)圖中結(jié)果推測,雜種植株B應(yīng)為六倍體,判斷依據(jù)是DNA相對含量175的細胞,與兩個二倍體馬鈴薯和一個二倍體茄子的DNA量相一致.
(4)取雜種植株B的根尖制成臨時裝片,進一步從染色體水平進行鑒定.在顯微鏡下找到有絲分裂中期的細胞,觀察并統(tǒng)計來自茄子和馬鈴薯的染色體數(shù)目,若來自茄子和馬鈴薯的染色體數(shù)分別為24和48,則支持上述推測.
(5)為確定雜種植株是否符合育種要求,還需對其進行青枯病抗性檢測.

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5.研究發(fā)現(xiàn),斑馬魚的HuC基因在早期胚胎神經(jīng)細胞中選擇性表達,為了研究該基因轉(zhuǎn)錄起始位點上游的部分序列對該基因表達的影響,科研人員做了如下實驗.
(1)為確定HuC基因的轉(zhuǎn)錄起始位點,提取斑馬魚早期胚胎神經(jīng)細胞的總RNA,以與HuCmRNA互補的一段單鏈DNA序列作為義務(wù)引物,加入逆轉(zhuǎn)錄酶,獲得cDNA.對該cDNA的序列進行測定,與HuC基因的序列比對,確定轉(zhuǎn)錄起始位點,定為+1號堿基,其上游的堿基定為負值.
(2)為了探究轉(zhuǎn)錄起始位點上游不同長度片段在基因轉(zhuǎn)錄中的作用,科研人員從基因組(選填“基因組”或“cDNA”)文庫中獲取該轉(zhuǎn)錄起始位點上游的片段,用限制酶和DNA連接酶處理此片段和含GFP(綠色熒光蛋白)基因的載體,獲得重組DNA分子.
(3)用不同種類的限制酶重復(fù)步驟(2),獲得不同長度的重組DNA分子,通過顯微注射方法分別導(dǎo)入斑馬魚的受精卵細胞,通過熒光顯微觀察早期胚胎神經(jīng)細胞肌肉細胞中的熒光強度,結(jié)果如圖所示.

①獲得圖中所示的重組DNA分子,需要用到的限制酶沒有7種.
②據(jù)圖分析,缺失HuC基因上游的-251bp至-1bp片段就會造成HuC基因在所有細胞中表達被完全抑制.-1962bp至-432bp片段的存在會部分抑制HuC基因在肌肉細胞中的表達,對神經(jīng)細胞中的表達無顯著影響.

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4.cAMP(環(huán)化-磷酸腺苷)是一種細胞內(nèi)的信號分子.研究表明,cAMP對初級卵母細胞完成減數(shù)第一次分裂有抑制作用,大致機理如圖所示.

(1)由圖可知,被激活的酶A能催化ATP能脫去兩個磷酸基團并發(fā)生環(huán)化形成cAMP,cAMP能活化酶P,活化的酶P能抑制初級卵母細胞分裂為次級卵母細胞和極體.
(2)女性在胚胎時期卵原細胞就發(fā)育成為初級卵母細胞,但初級卵母細胞啟動減數(shù)第一次分裂則需要等到進入青春期之后.依據(jù)上圖推測,進入青春期后女性的初級卵母細胞恢復(fù)分裂的信號途徑是信號分子2作用于S2蛋白,通過G2蛋白抑制酶A,細胞內(nèi)的cAMP濃度降低,活化的酶P減少,解除了對減數(shù)第一次分裂的抑制作用.
(3)初級卵母細胞的不均等分裂依賴于細胞膜內(nèi)陷位置形成的縊縮環(huán).有人認(rèn)為cAMP抑制減數(shù)第一次分裂是因為影響了縊縮環(huán),為此搜集了小鼠的初級卵母細胞,在誘導(dǎo)恢復(fù)分裂后,用兩種特異性藥物(藥物H和藥物F)進行了實驗,結(jié)果如圖所示.

①應(yīng)從小鼠的卵巢(器官)中獲取初級卵母細胞,然后轉(zhuǎn)移到37℃,含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng).
②判斷兩種特異性藥物的作用:藥物F特異性活化酶A,藥物H特異性抑制酶P.
③由實驗結(jié)果分析,cAMP抑制減數(shù)第一次分裂的原因可能是阻止縊縮環(huán)的形成(或“促進縊縮環(huán)的退化”)及干擾縊縮環(huán)的定位.

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3.科研人員研究了日光溫室中的黃瓜葉片的光合作用.
(1)與大田相比,日光溫室光照強度不足,生長的黃瓜植株形態(tài)上出現(xiàn)植株高大、葉片多、葉面積大等適應(yīng)性特征,導(dǎo)致葉片相互遮陰嚴(yán)重.
(2)研究者分別測定日光溫室中同一品種黃瓜不同葉位葉片的光合速率,實驗結(jié)果如圖所示.據(jù)圖可知,日光溫室內(nèi)黃瓜葉片的光合速率從大到小依次為中上位葉、上位葉和基部葉.研究者推測,在于葉片中葉綠體的發(fā)育狀況不同有關(guān).
(3)為證實上述推測,研究者進一步觀察不同葉位葉片的葉綠體超微結(jié)構(gòu),得到下表所示結(jié)果.
葉位基粒厚度(μm)片層數(shù)
上位葉1.7910.90
中上位葉2.4617.77
基部葉3.0617.91
①葉綠體基粒厚度和片層數(shù)等超微結(jié)構(gòu)的必須在電子顯微鏡下觀察.實驗結(jié)果表明,不同葉位葉片光合速率的高低與葉綠體超微結(jié)構(gòu)的觀察結(jié)果不一致.
②葉綠體中光合色素分子對光的吸收發(fā)生在類囊體膜上,雖然基部葉的葉綠體超微結(jié)構(gòu)特征是對弱光的一種適應(yīng),但是基部葉光合速率仍然最低.因此進一步推測,除了葉齡因素外,光合速率的差異可能還與葉片接受的光照強度不同有關(guān).
(4)為證實(3)中推測,可在同一光照強度下測定不同葉位葉片的光合速率,與(2)的結(jié)果相比較,若不同葉位葉片光合速率的差異減小,則證實這一推測.
(5)根據(jù)上述研究結(jié)果,請你為溫室栽培提高黃瓜產(chǎn)量,提出可行建議:摘除基部葉(衰老葉片)、適當(dāng)補光.

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2.線粒體不僅是細胞的“能量工廠”,也在細胞凋亡的調(diào)控中起重要作用,如圖所示.

(1)線粒體中的細胞色素c嵌入在線粒體內(nèi)膜的脂雙層中,參與有氧呼吸第三階段的化學(xué)反應(yīng).
(2)當(dāng)紫外線、DNA損傷、化學(xué)因素等導(dǎo)致細胞損傷時,線粒體外膜的通透性發(fā)生改變,細胞色素c被釋放到細胞溶膠(或“細胞質(zhì)基質(zhì)”)中,與蛋白A結(jié)合,在ATP的作用下,使C-9酶前體轉(zhuǎn)化為活化的C-9酶,活化的C-9酶激活C-3酶,引起細胞凋亡.
(3)活化的C-3酶可作用于線粒體,加速細胞色素c的釋放,從而加速細胞的凋亡,這是正反饋調(diào)節(jié)機制.
(4)細胞凋亡是細胞的程序性(或“編程性”)死亡,凋亡細胞解體后被吞噬細胞吞噬,由細胞內(nèi)的溶酶體將其消化.

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1.下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述,正確的是( 。
A.培養(yǎng)原理都是細胞的全能性B.都通過有絲分裂增加細胞數(shù)目
C.培養(yǎng)材料都必須取自分生組織D.都經(jīng)過脫分化恢復(fù)細胞全能性

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20.花椰菜(2n=18)易患黑腐病,造成減產(chǎn),黑芥(2n=16)對黑腐病有較好的抗性.研究者誘導(dǎo)花椰菜原生質(zhì)體與紫外線處理的黑芥原生質(zhì)體融合,得到染色體數(shù)分別為20、25和26的三個抗黑腐病的新品種,這三個新品種中均含有花椰菜的兩個完整染色體組.下列相關(guān)敘述中,合理的是( 。
A.需用胰蛋白酶處理花椰菜和黑界獲得原生質(zhì)體
B.染色體數(shù)為26的新品種一定是三倍體
C.三個新品種的抗病基因可能來自不同染色體
D.三個新品種花椰菜均不能形成可育配子

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