回答下列關(guān)于微生物的問題.
資料:
基本培養(yǎng)基:能滿足某一菌種野生型菌株?duì)I養(yǎng)要求的最低成分的培養(yǎng)基.
補(bǔ)充培養(yǎng)基:營養(yǎng)缺陷型菌株必須在基本培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的一種或幾種營養(yǎng)成分才能正常生長的培養(yǎng)基.
完全培養(yǎng)基:在基本培養(yǎng)基中加入一些富含氨基酸、維生素和堿基之類的天然物質(zhì),可以滿足該微生物的各種營養(yǎng)缺陷型生長的培養(yǎng)基.
青霉素能抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的生物合成,可用于淘汰野生型菌株.
營養(yǎng)缺陷型是一些營養(yǎng)物質(zhì)(如氨基酸、維生素和堿基等)的合成能力上出現(xiàn)缺陷的菌株.某小組同學(xué)選用紫外線為誘變劑,誘發(fā)大腸桿菌(E.coli)突變,期望獲得某種營養(yǎng)缺陷型菌株.用青霉素法淘汰野生型,并檢出缺陷型.
(1)取一環(huán)E.coli置于5mL LB液體三角瓶中,37℃培養(yǎng)一段時(shí)間.LB培養(yǎng)液:酵母膏0.5g、蛋白胨1g、NaCl 0.5g、水100mL.LB是
培養(yǎng)基,如要配制成固體培養(yǎng)基則要添加
.
(2)取培養(yǎng)的菌液離心等處理,加入培養(yǎng)皿中加蓋,置于15W紫外燈下30cm處照射1min,然后打開皿蓋照射1-3min,置于37℃避光培養(yǎng)一段時(shí)間.此步驟的目的是
.
(3)取上述培養(yǎng)菌液離心等處理后于無氮培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)一段時(shí)間;加入含氮的基本培養(yǎng)基和青霉素,再37℃培養(yǎng)一段時(shí)間;從培養(yǎng)后的菌液中取0.1mL到含有基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基的兩個培養(yǎng)皿中涂布,37℃培養(yǎng).細(xì)菌先在無氮培養(yǎng)基中培養(yǎng)的目的是消耗體內(nèi)的氮素,停止生長,避免
型被以后加入的青霉素殺死.這些步驟的目的是
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(4)如果菌株在基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基中的菌落數(shù)大致相等,則說明
.對此,可能原因有
(寫一點(diǎn)即可).
(5)選擇在完全培養(yǎng)基中生長的菌落分別點(diǎn)種在劃線對應(yīng)編號的基本培養(yǎng)基(A)和完全培養(yǎng)基(B)上培養(yǎng).如圖.點(diǎn)種的培養(yǎng)基的先后順序是先基本后完全培養(yǎng)基.選在A上不生長在B上生長的菌落,在基本培養(yǎng)基上劃線,培養(yǎng).劃線后可能細(xì)菌生長或者不生長,對結(jié)果進(jìn)行分析:
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(6)對營養(yǎng)物質(zhì)缺陷類型進(jìn)行鑒定的過程,需要用到的培養(yǎng)基
(多選).
A、基本培養(yǎng)基 B、完全培養(yǎng)基 C、補(bǔ)充培養(yǎng)基 D、選擇培養(yǎng)基.