Question

4．用超聲波處理煙草基因組DNA后，用下列哪一個(gè)工程酶處理可以獲得平末端片段，用于后續(xù)克隆：（　�。�

• A． 限制性內(nèi)切酶
• B． 大腸桿菌DNA聚合酶
• C． Klenown片段
• D． 反轉(zhuǎn)錄酶

Answer 1

分析 酶工程就是將酶或者微生物細(xì)胞，動(dòng)植物細(xì)胞，細(xì)胞器等在一定的生物反應(yīng)裝置中，利用酶所具有的生物催化功能，借助工程手段將相應(yīng)的原料轉(zhuǎn)化成有用物質(zhì)并應(yīng)用于社會(huì)生活的一門科學(xué)技術(shù)．它包括酶制劑的制備，酶的固定化，酶的修飾與改造及酶反應(yīng)器等方面內(nèi)容．

解答 解：超聲波處理煙草基因組DNA后，隨機(jī)將目的DNA斷裂成平末端或黏膜端．A是用于切割，D是用于逆轉(zhuǎn)錄，C為Klenow片段，又名DNA聚合酶I大片段（克列諾片段或稱克列諾酶）：E．coli DNA聚合酶Ⅰ經(jīng)胰蛋白酶或枯草桿菌蛋白酶部分水解生成的C末端605個(gè)氨基酸殘基片段．該片段保留了DNA聚合酶I的5ˊ-3ˊ聚合酶和3ˊ-5ˊ外切酶活性，但缺少完整酶的5ˊ-3ˊ外切酶活性．DNA聚合酶I（DNA-pol I）斷開(kāi)后的存在另一個(gè)323個(gè)氨基酸殘基片段，保留5‘-3’外切酶活性，一般用于cDNA第二鏈的合成，填補(bǔ)DNA單鏈為雙鏈．DNA聚合酶可以直接在脫氧核苷酸鏈片段的3’末端直接添加單個(gè)脫氧核苷酸補(bǔ)平雙鏈．因此用超聲波處理煙草基因組DNA后，用大腸桿菌DNA聚合酶處理可以獲得平末端片段，用于后續(xù)克隆
故選：B

點(diǎn)評(píng) 解答此類題目的關(guān)鍵是理解掌握酶工程和過(guò)程和原理．