【題目】圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程示意圖,載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)EcoRV酶切位點(diǎn)為,EcoR V酶切出來(lái)的線性載體P1為___________未端。
(2)用TaqDNA聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得的目的基因片段,其兩端各自帶有一個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理,在兩端各添加了一個(gè)堿基為___________的脫氧核苷酸,形成P2;P2和目的基因片段在__________酶作用下,形成重組質(zhì)粒P3。
(3)為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落,采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選,得到A、B、C三類(lèi)菌落,其生長(zhǎng)情況如下表(“+”代表生長(zhǎng),“﹣”代表不生長(zhǎng))。根據(jù)表中結(jié)果判斷,應(yīng)選擇的菌落是__________(填表中字母)類(lèi),另外兩類(lèi)菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是_____、________________。
菌落類(lèi)型平板類(lèi)型 | A | B | C |
無(wú)抗生素 | ﹢ | ﹢ | ﹢ |
氨芐青霉素 | ﹢ | ﹢ | ﹣ |
四環(huán)素 | ﹢ | ﹣ | ﹣ |
氨芐青霉素+四環(huán)素 | ﹢ | ﹣ | ﹣ |
(4)為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒,擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR鑒定。圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置,PCR鑒定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是__________。某學(xué)生嘗試用圖中另外一對(duì)引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp片段,原因是_______________。
【答案】平 胸腺嘧啶(T) DNA連接 B A類(lèi)菌落含有P0 C類(lèi)菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒 乙丙 目的基因反向連接
【解析】
基因表達(dá)載體的基本結(jié)構(gòu)包括復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子等。根據(jù)題干信息和圖形分析,P0是載體質(zhì)粒,其含有的氨芐青霉素抗性基因(ampr)和四環(huán)素抗性基因(tetr)都屬于標(biāo)記基因,可以用檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞;EcoRV酶為限制酶,其切割質(zhì)粒后悔破壞了四環(huán)素抗性基因(tetr)。
(1)根據(jù)題意分析,EcoRV酶識(shí)別的序列是-GATATC-,并且兩條鏈都在中間的T與A之間進(jìn)行切割,因此其切出來(lái)的線性載體P1為平末端。
(2)據(jù)圖分析,目的基因兩側(cè)為粘性末端,且漏出的堿基為A,則在載體P1的兩端需要個(gè)加一個(gè)堿基T形成具有粘性末端的載體P2,再用DNA連接酶將P2與目的基因連接起來(lái)形成重組質(zhì)粒P3。
(3)根據(jù)以上分析已知,限制酶切割后破壞了四環(huán)素抗性基因,但是沒(méi)有破壞氨芐青霉素抗性基因,因此含有重組質(zhì)粒P3的菌落在四環(huán)素中應(yīng)該不能生長(zhǎng),而在氨芐青霉素的培養(yǎng)基中能生長(zhǎng),結(jié)合表格分析可知,應(yīng)該選擇B類(lèi)菌落。根據(jù)表格分析,A類(lèi)菌落在氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基中都能夠生長(zhǎng),說(shuō)明其導(dǎo)入的是P0;C類(lèi)菌落在任何抗生素的培養(yǎng)基中都不能生長(zhǎng),說(shuō)明其沒(méi)有導(dǎo)入任何質(zhì)粒。
(4)據(jù)圖分析,根據(jù)目的基因插入的位置和PCR技術(shù)的原理分析,PCR鑒定時(shí)應(yīng)該選擇的一對(duì)引物是乙和丙;根據(jù)題意和圖形分析,某同學(xué)用圖中的另外一對(duì)引物(甲、乙)從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp的片段,說(shuō)明其目的基因發(fā)生了反向連接。
年級(jí) | 高中課程 | 年級(jí) | 初中課程 |
高一 | 高一免費(fèi)課程推薦! | 初一 | 初一免費(fèi)課程推薦! |
高二 | 高二免費(fèi)課程推薦! | 初二 | 初二免費(fèi)課程推薦! |
高三 | 高三免費(fèi)課程推薦! | 初三 | 初三免費(fèi)課程推薦! |
科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】下列各項(xiàng)中,表達(dá)正確的是( )
A.n個(gè)堿基組成的DNA分子片段,其種類(lèi)最多可達(dá)
B.某DNA分子含胸腺嘧啶a個(gè),該DNA分子復(fù)制n次,需要游離的腺嘌呤
C.以雜合子(Dd)為親本,讓其連續(xù)自交n代,從理論上推算,第n代雜合子出現(xiàn)的概率為
D.連續(xù)培養(yǎng)噬菌體n代,則含母鏈的脫氧核苷酸鏈應(yīng)占子代DNA的脫氧核苷酸鏈總數(shù)的
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】下圖表示脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元、閏紹細(xì)胞(興奮時(shí)能釋放抑制性神經(jīng)遞質(zhì))共同支配肌肉收縮的示意圖,下列有關(guān)敘述,正確的是( 。
A.圖中至少包含一條完整的反射弧
B.圖中4個(gè)突觸的后膜均為神經(jīng)元的胞體或樹(shù)突
C.閏紹細(xì)胞釋放的遞質(zhì)可引起突觸后膜的膜電位差減小
D.沖動(dòng)經(jīng)過(guò)圖示環(huán)式傳遞后可能會(huì)終止,這是一種負(fù)反饋調(diào)節(jié)
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】玉米是一年生雌雄冋株異花授粉植物,其籽粒的顏色受兩對(duì)等位基因A、a和B、b控制。A基因存在時(shí),能合成酶Ⅰ;B基因存在時(shí),酶Ⅱ的合成受到抑制,兩對(duì)等位基因獨(dú)立遺傳。籽粒顏色的轉(zhuǎn)化關(guān)系為: 研究發(fā)現(xiàn)純合紫粒玉米的花粉完全敗育,不具備受精能力,其它類(lèi)型玉米的花粉正常。將雜合白粒玉米和純合紫粒玉米進(jìn)行間行種植,F(xiàn)1中收獲得到的玉米共有三種類(lèi)型:白粒、黃粒和紫粒。回答下列問(wèn)題:
(1)上述實(shí)例體現(xiàn)基因通過(guò)___________,進(jìn)而控制生物體的性狀(如籽粒顏色)。
(2)F1中白粒玉米的基因型有___________種,F(xiàn)1的白粒玉米中純合子的比例是___________。
(3)從F1中隨機(jī)選取一粒玉米通過(guò)其顏色___________(“能”或“不能”)判斷其母本是雜合白粒玉米或純合紫粒玉米,理由是______________________。
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】下圖是某藻類(lèi)在不同環(huán)境溫度下的種群數(shù)量增長(zhǎng)曲線。有關(guān)敘述不正確的是( )
A.環(huán)境容納量隨環(huán)境溫度不同而改變
B.19.8℃條件下環(huán)境容納量最小
C.24.8℃條件下第5天左右的種群增長(zhǎng)速率最大
D.33.6℃條件下種群數(shù)量將維持在K值恒定不變
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】關(guān)于下圖說(shuō)法正確的是( )
A.過(guò)程①會(huì)形成細(xì)胞板,將一個(gè)細(xì)胞分為兩個(gè)子細(xì)胞
B.過(guò)程④產(chǎn)生不同形態(tài)組織細(xì)胞,是不同細(xì)胞含有不同的DNA導(dǎo)致的
C.過(guò)程①、②、③、④依次使細(xì)胞的全能性逐漸增加
D.生物體生長(zhǎng)發(fā)育是細(xì)胞分裂和分化的結(jié)果,細(xì)胞分裂是細(xì)胞分化的基礎(chǔ)
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】如圖表示基因型為AaBb(兩對(duì)基因位于非同源染色體上)的某雄性動(dòng)物的部分細(xì)胞分裂過(guò)程。下列有關(guān)①②③過(guò)程中染色體和基因分離情況的說(shuō)法,正確的是( )
A.①②③過(guò)程中都會(huì)發(fā)生姐妹染色單體的分離
B.①過(guò)程中隨著絲點(diǎn)的分裂,同源染色體彼此分離
C.②過(guò)程的后期可能會(huì)發(fā)生A和b基因、a和B基因的自由組合
D.基因組成為AaB的配子的產(chǎn)生是由③過(guò)程中染色體分離異常導(dǎo)致的
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】日前微博傳言手機(jī)屏幕比馬桶按鈕單位面積上的細(xì)菌多,為辨別真?zhèn)危瑑呻娨暸_(tái)利用微生物培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),過(guò)程及結(jié)果如下,下列敘述錯(cuò)誤的是( )
A.以上兩組實(shí)驗(yàn)在接種過(guò)程中均需用到酒精燈、接種環(huán)等
B.該實(shí)驗(yàn)對(duì)照組可以設(shè)置為取相同培養(yǎng)基接種等量無(wú)菌水進(jìn)行培養(yǎng)
C.通過(guò)觀察菌落的形態(tài)、大小,可知手機(jī)屏幕和馬桶按鈕上都存在多種微生物
D.兩組實(shí)驗(yàn)操作均正確且完全一致,但結(jié)果截然不同,原因可能是取樣部位不同
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】某有機(jī)物的結(jié)構(gòu)如下式,在以下六種反應(yīng)類(lèi)型: ①加成②水解③酯化④氧化⑤中和⑥消去中,它在一定條件下能夠發(fā)生的反應(yīng)是
A.②③④B.①③⑤⑥C.②③④⑤⑥D.①③④⑤
查看答案和解析>>
百度致信 - 練習(xí)冊(cè)列表 - 試題列表
湖北省互聯(lián)網(wǎng)違法和不良信息舉報(bào)平臺(tái) | 網(wǎng)上有害信息舉報(bào)專(zhuān)區(qū) | 電信詐騙舉報(bào)專(zhuān)區(qū) | 涉歷史虛無(wú)主義有害信息舉報(bào)專(zhuān)區(qū) | 涉企侵權(quán)舉報(bào)專(zhuān)區(qū)
違法和不良信息舉報(bào)電話:027-86699610 舉報(bào)郵箱:58377363@163.com