Question

【題目】農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長期使用會污染土壤。為修復(fù)被污染的土壤，可按圖示程序選育出能降解該除草劑的細菌。已知該除草劑(含氮有機物)在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明。請分析回答：

(1)微生物接種是微生物學(xué)研究中最常用的基本操作技術(shù)，該技術(shù)的核心是_______。

(2) 在選育過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一______的培養(yǎng)基上。通過比較單菌落周圍__________的大小，可篩選出高效的目的菌。實驗結(jié)果如右圖顯示的A～E五種菌株中，_______是最理想菌株。

(3) 若想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數(shù)，可采用的接種方法是_______。將lmL土壤溶液分別稀釋10倍和100倍，每種稀釋度各在3個平板上分別接入0.lmL稀釋液，經(jīng)過適當培養(yǎng)后，6個平板上的菌落數(shù)分別為59、57、58和2、7、5，空白對照組的平板上沒有菌落，則每升土壤溶液中活菌數(shù)的理論值為_____________個。實際上每升土壤溶液中的活菌數(shù)比通過統(tǒng)計所得的這一數(shù)值要大，因為______________________。

(4) 科研人員用放射線處理該細菌，獲得突變株A和B，然后對突變株A和B進行實驗，結(jié)果如下表所示：

接種的菌種	一般培養(yǎng)基	實驗處理及結(jié)果
A	不生長	添加營養(yǎng)物質(zhì)甲，能生長
B	不生長	添加營養(yǎng)物質(zhì)乙，能生長
A＋B	能生長	不添加營養(yǎng)物質(zhì)甲、乙，能生長

請分析突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長的最可能原因。___________________________________________。

Answer 1

【答案】 防止雜菌污染（無菌操作） 氮源 透明圈 E 稀釋涂布平板法 5.8×106 統(tǒng)計結(jié)果是用菌落數(shù)來表示的，當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 突變株A生長需要營養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B可以提供；突變株B生長需要營養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株A可以提供

【解析】試題分析：本題綜合考查學(xué)生對微生物的實驗室培養(yǎng)、微生物的分離與鑒定等相關(guān)知識的識記和理解能力。解答本題需熟記并理解相應(yīng)的基礎(chǔ)知識并形成清晰的知識網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上，結(jié)合問題情境，從題意和圖表中提取有效信息進行相關(guān)問題的解答。

(1) 微生物接種技術(shù)的核心是防止雜菌污染（無菌操作）。

(2) 已知該除草劑為含氮有機物，在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明；降解該除草劑的細菌能分解培養(yǎng)基中的該除草劑，使培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈�？梢姡�在選育能降解該除草劑的細菌的過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種于以該除草劑為唯一氮源的培養(yǎng)基上。通過比較單菌落周圍透明圈的大小，可篩選出高效的目的菌。實驗結(jié)果圖顯示的A～E五種菌株中，E菌落周圍的透明圈最大，因此E是最理想菌株。

(3) 對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數(shù)，可采用稀釋涂布平板法進行接種。統(tǒng)計菌落數(shù)目時，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，因此應(yīng)選擇稀釋度為10倍的、分別接入0.lmL稀釋液的3個平板上菌落數(shù)（分別為59、57、58）進行統(tǒng)計，則每升土壤溶液中活菌數(shù)的理論值為[(59＋57＋58)÷3]×10 ÷(0.1×10-3)＝5.8×106個。由于統(tǒng)計結(jié)果是用菌落數(shù)來表示的，當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以實際上每升土壤溶液中的活菌數(shù)比通過統(tǒng)計所得的這一數(shù)值要大。

(4)分析表中信息可知：突變株A生長需要營養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B生長需要營養(yǎng)物質(zhì)乙，據(jù)此可推知，突變株A和B混合在一起接種于一般培養(yǎng)基中能生長的最可能原因是：突變株A生長需要營養(yǎng)物質(zhì)甲，突變株B可以提供；突變株B生長需要營養(yǎng)物質(zhì)乙，突變株A可以提供。