Question

9．應(yīng)用生物工程技術(shù)獲得生物新品種或者生物制品是生物工程價(jià)值的體現(xiàn)，請(qǐng)回答下列有關(guān)生物工程的問題：

（1）目的基因克隆利用PCR技術(shù)，在此過程中，除需要加人ATP、酶、原料、模板外，還需要加人的物質(zhì)是引物；
（2）圖中將目的基因?qū)�人畢赤酵母菌前，需要用鈣離子處理畢赤酵母菌，使其處于感受態(tài)細(xì)胞，然后再進(jìn)行導(dǎo)入．基因表達(dá)載體導(dǎo)入與否可依據(jù)標(biāo)記基因控制的性狀是否出現(xiàn)來判斷，該過程中分離純化菌種的過程所利用的培養(yǎng)基具有選擇作用．
（3）甲醇能誘導(dǎo)抗菌肽表達(dá)，可能與激活目的基因首端的啟動(dòng)子有關(guān)．檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)用抗原抗體雜交方法，而要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定，則需要將基因工程產(chǎn)品活性鑒定以確定其活性．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）目的基因克隆利用PCR技術(shù)，在此過程中，除需要加入ATP、酶、原料、模板外，還需要加如的物質(zhì)兩種不同的引物；
（2）將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的常用的方法是感受態(tài)細(xì)胞法，故將目的基因?qū)�人畢赤酵母菌前，需要用鈣離子處理畢赤酵母菌，使其處于感受態(tài)細(xì)胞，然后再進(jìn)行導(dǎo)入．基因表達(dá)載體導(dǎo)入與否可依據(jù)標(biāo)記基因控制的性狀是否出現(xiàn)來判斷，如具有抗某種抗生素的特性等，該過程中分離純化菌種的過程所利用的培養(yǎng)基具有選擇作用．
（3）甲醇能誘導(dǎo)抗菌膚表達(dá)，可能與激活目的基因首端的啟動(dòng)子有關(guān)．檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)用抗原抗體雜交方法，而要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定，則需要將基因工程產(chǎn)品提取出來進(jìn)行活性鑒定以確定其活性．
故答案為：
（1）PCR  引物 
（2）鈣離子  感受態(tài)細(xì)胞  標(biāo)記基因  選擇 
（3）啟動(dòng)子  抗原抗體雜交  活性鑒定

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．