Question

【題目】回答下列有關(guān)動物細胞工程的問題：

（1）動物細胞培養(yǎng)需要充足的營養(yǎng)、適宜的溫度和pH 、______________的環(huán)境和一定的氣體環(huán)境等條件。當貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的________________。此時，瓶壁上形成的細胞層數(shù)是_______。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，可用_____________處理。

（2）克隆動物的培育體現(xiàn)了 ________________的全能性，使用的供體細胞一般都是傳代10代以內(nèi)的細胞，以保持細胞 __________________。

（3）單克隆抗體制備過程中，B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合常用___________作為動物特有的誘導因素。對經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞，還需進行_______________，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。

Answer 1

【答案】無菌、無毒 接觸抑制 單層 胰蛋白酶 動物體細胞核 正常的二倍體核型 滅活的病毒 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測

【解析】

1、動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度：適宜溫度：哺乳動物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2~7.4。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。
2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（1）動物細胞培養(yǎng)需要充足的營養(yǎng)、適宜的溫度和pH、無菌、無毒的環(huán)境和一定的氣體環(huán)境等條件。當貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制。此時，瓶壁上形成的細胞層數(shù)是單層。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，可用胰蛋白酶處理。
（2）克隆動物的培育主要采用了核移植技術(shù)，這體現(xiàn)了動物細胞核的全能性；由于傳代10代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型，因此使用的供體細胞一般都是傳代10代以內(nèi)的細胞。
（3）單克隆抗體制備過程中，B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合常用滅活的病毒作為誘導因素。經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞，還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量雜交瘤細胞，既能分泌特異性抗體，又能無限繁殖。