Question

【題目】我們?nèi)粘３缘拇竺字需F含量極低，科研人員通過(guò)基因工程等技術(shù)，培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉(zhuǎn)基因水稻，改良了稻米的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。下面為培育轉(zhuǎn)基因水稻過(guò)程示意圖，請(qǐng)回答：

（1）在上述工程中，鐵結(jié)合蛋白基因稱為___________，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增鐵結(jié)合蛋白基因時(shí)，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)是___________、___________、4種脫氧核糖核苷酸和耐熱性的DNA聚合酶，擴(kuò)增過(guò)程在PCR擴(kuò)增儀中完成。

（2）將鐵結(jié)合蛋白基因?qū)�入小鼠體內(nèi)之前，需要操作的核心步驟是______________________，此步驟最常用的工具是___________。

（3）將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時(shí)，通過(guò)培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得______________________；培養(yǎng)基3與培養(yǎng)基2的主要區(qū)別是_________________________________。

（4）檢測(cè)培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達(dá)到，需要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻______________________。

Answer 1

【答案】目的基因 引物 PCR 反應(yīng)緩沖液 構(gòu)建基因表達(dá)載體 限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶、載體 含有重組質(zhì)粒的愈傷組織 生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度比例 種子中鐵含量

【解析】

本題中培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是為了培育出鐵含量比普通大米高的水稻，因此需要大量的鐵結(jié)合蛋白基因，要大量獲得一般采用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。要構(gòu)建重組質(zhì)粒要用同一種限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒。將外植物培養(yǎng)成試管苗的過(guò)程要用到不同的培養(yǎng)基，培養(yǎng)最明顯的差別在于所添加激素的種類和比例的不同。轉(zhuǎn)基因水稻的目的是獲得鐵含量較高的大米，因此檢測(cè)時(shí)應(yīng)看轉(zhuǎn)基因水稻種子中鐵的含量。

（1）在上述工程中，鐵結(jié)合蛋白基因稱為目的基因。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增鐵結(jié)合蛋白基因時(shí)，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)是引物、PCR 反應(yīng)緩沖液、4種脫氧核糖核苷酸和耐熱性的DNA聚合酶。

（2）鐵結(jié)合蛋白基因易丟失，因此構(gòu)建基因表達(dá)載體是導(dǎo)入小鼠體內(nèi)之前最核心的步驟。此步驟最常用的工具是限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶、載體。

（3）將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時(shí)，通過(guò)培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得含有重組質(zhì)粒的愈傷組織。在愈傷組織培養(yǎng)的不同階段，植物激素的配比發(fā)生變化，以適應(yīng)植物不同階段的需求，培養(yǎng)基3與培養(yǎng)基2的主要區(qū)別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度比例。

（4）鐵結(jié)合蛋白基因表達(dá)可以提高水稻中鐵的含量。檢測(cè)培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達(dá)到，需要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻種子中鐵含量。