Question

16．欲降低農(nóng)作物表面農(nóng)藥甲氰菊酯的殘留量，現(xiàn)從土壤中分離純化能降解甲氰菊酯的菌株，分離方法如下圖．

（1）土樣選自經(jīng)常噴施甲氰菊酯（或富含甲氰菊酯）的土壤中；富集培養(yǎng)基需含豐富的碳源、氮源水和無機鹽．
（2）在操作過程中，取土樣用的小鐵鏟和剩土樣的信封在使用前需要（“需要”或“不需要”）滅菌，并在火焰附近將取好的土樣倒入錐形瓶中，塞好棉塞．
（3）培養(yǎng)基換成“基礎培養(yǎng)基+甲氰菊酯500mg/mL”的目的是只讓降解甲氰菊酯的菌存活（或選樣培養(yǎng)能降解甲氰菊酯植株）．
（4）最后一步分離純化菌種的方法一般是不能（“能”或“不能”） 用來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目．
（5）欲選擇高效降解甲氰菊酯的菌株，還需將分離的各菌株接種在不同濃度梯度的甲氰菊酯作營養(yǎng)的基礎培養(yǎng)基上，選擇適應濃度高、生長繁殖快而旺盛的單菌落保存．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學成分	根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學藥品反應，產(chǎn)生明顯的特征變化而設計	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．

解答 解：（1）要從土壤中分離純化能降解甲氰菊酯的菌株，則土樣應該選自經(jīng)常噴施甲氰菊酯（或富含甲氰菊酯） 的土壤中；培養(yǎng)基中最基本的成分有碳源、氮源、水和無機鹽．
（2）在操作過程中，關鍵是要無菌操作，因此取土樣用的小鐵鏟和剩土樣的信封在使用前需要滅菌，并在火焰附近將取好的土樣倒入錐形瓶中，塞好棉塞．
（3）培養(yǎng)基換成“基礎培養(yǎng)基+甲氰菊酯500mg/mL”的目的是只讓降解甲氰菊酯的菌存活（或選樣培養(yǎng)能降解甲氰菊酯植株），這屬于選擇培養(yǎng)基．
（4）最后一步分離純化菌種的方法一般是為平板劃線法，該方法不能用來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目．
（5）欲選擇高效降解甲氰菊酯的菌株，還需將分離的各菌株接種在不同濃度梯度的甲氰菊酯作營養(yǎng)的基礎培養(yǎng)基上，選擇適應濃度高、生長繁殖快而旺盛的單菌落保存．
故答案為：
（1）經(jīng)常噴施甲氰菊酯（或富含甲氰菊酯）    碳源   氮源（順序可顛倒）
（2）需要    火焰
（3）只讓降解甲氰菊酯的菌存活（或選樣培養(yǎng)能降解甲氰菊酯植株）
（4）不能    
（5）不同濃度梯度

點評 本題結(jié)合圖解，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記培養(yǎng)基的組成成分、種類及功能，掌握接種微生物常用的兩種方法，再結(jié)合題中信息準確答題．