Question

某科學(xué)機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素，從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個堿基對形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補(bǔ)平，獲得雙鏈DNA，過程如圖1．

分析回答下列問題：
（1）Klenow酶是一種

 

酶，與之有相同作用但連接對象不同的酶是

 

．合成的雙鏈DNA有

 

個堿基對．該種獲得生物新產(chǎn)品的技術(shù)稱為

 

．
（2）在獲取目的基因時，除上述方法外，還可有多種途徑：如圖2從含有目的基因的DNA片段上直接進(jìn)行剪切，則“剪刀”作用位點(diǎn)在

 

（a處還是b處），a處的化學(xué)鍵為

 

．在基因工程的各種操作過程中，a處可能出現(xiàn)的酶有

 

、

 

．DNA分子復(fù)制時作用于b處的酶是

 

，該化學(xué)鍵稱為

 

．
（3）已知BamHⅠ與BglⅡ的識別序列及切割位點(diǎn)如圖3所示，用這兩種酶和DNA連接酶對一段含有數(shù)個BamHⅠ和BglⅡ識別序列的DNA分子進(jìn)行反復(fù)的切割、連接操作，若干循環(huán)后“AGATCC∥TCTAGG”和

 

序列明顯增多，該過程中DNA連接酶催化

 

鍵的形成．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析圖解：圖為人工合成的方法獲取目的基因，觀察圖可以發(fā)現(xiàn)通過Klenow酶能夠?qū)�單鏈DNA延伸，并且中間形成18個堿基對，則兩側(cè)分別有（72-18）=54個堿基．

解答： 解：（1）由圖可知，Klenow酶能夠?qū)�單鏈DNA延伸，所以是一種DNA聚合酶，DNA聚合酶和DNA連接酶都能形成磷酸二酯鍵，但前者是把單個的脫氧核苷酸連接起來，后者是把DNA片段連接起來．合成的雙鏈DNA分子中有堿基對54+18+54=126個．根據(jù)題意，從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，從而對蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，所以是蛋白質(zhì)工程．
（2）從含有目的基因的DNA片段上直接進(jìn)行剪切所用的酶是限制酶，其作用是破壞磷酸二酯鍵，所以作用位點(diǎn)是a處．作用于磷酸二酯鍵的酶有限制酶，DNA聚合酶和DNA連接酶．DNA分子復(fù)制過程作用于b處（氫鍵）的酶是解旋酶．
（3）圖中DNA兩片段經(jīng)酶切后共得到四個片斷，切割后形成的黏性末端相同，其中有二個片段組成了已知序列，則另一序列必為剩余的二個片段組成．DNA連接酶催化的是磷酸二酯鍵．
答案：（1）DNA聚合酶    DNA連接酶    126    蛋白質(zhì)工程
（2）a處    磷酸二酯鍵    限制酶   DNA聚合酶、DNA連接酶   解旋酶   氫鍵
（3）GGATCT∥CCTAGA   磷酸二酯鍵

點(diǎn)評：本題考查基因工程相關(guān)知識，意在考查考生能從課外材料中獲取相關(guān)的生物學(xué)信息，并能運(yùn)用這些信息，結(jié)合所學(xué)知識解決相關(guān)的生物學(xué)問題．