Question

嗜熱土壤芽胞桿菌產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一種耐熱纖維素酶，為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用，開(kāi)展了以下試驗(yàn)：

Ⅰ.利用大腸桿菌表達(dá)BglB酶

（1）PCR擴(kuò)增bglB基因時(shí)，選用 基因組DNA作模板。

（2）如圖為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。bglB基因不含圖中限制酶識(shí)別序列。為使PCR擴(kuò)增的bglB基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，擴(kuò)增的bglB基因兩端需分別引入 和 不同限制酶的識(shí)別序列。

Ⅱ.溫度對(duì)BglB酶活性的影響

（3）據(jù)圖1、2可知，80℃保溫30分鐘后，BglB酶會(huì) ；為高效利用BglB酶降解纖維素，反應(yīng)溫度最好控制在 （單選）。

A.50℃ B.60℃ C.70℃ D.80℃

Answer 1

（1）嗜熱土壤芽孢桿菌 （2）NdeⅠ BamHⅠ （3）失活 B

【解析】

試題分析：（1）由“嗜熱土壤芽胞桿菌產(chǎn)生的β—葡萄糖苷酶（BglB）是一種耐熱纖維素酶”可知bglB基因存在于嗜熱土壤芽胞桿菌，因此可從嗜熱土壤芽胞桿菌基因組文庫(kù)中獲取目的基因，然后采用PCR技術(shù)擴(kuò)增bglB基因。

（2）在基因表達(dá)載體的構(gòu)建中，目的基因插入到啟動(dòng)子和終止子之間，啟動(dòng)子和終止子之間有Ndel、XbaⅠ、BamHⅠ三種限制酶識(shí)別和切割位點(diǎn)。據(jù)圖可知，終止子的兩端有XbaⅠ限制酶切割位點(diǎn)，因此不能使用XbaⅠ限制酶切割質(zhì)粒，故只能用Ndel和BamHⅠ限制酶切割質(zhì)粒。目的基因與質(zhì)粒具有相同的粘性末端才可以連接形成重組質(zhì)粒，所以目的基因兩端需分別引入Ndel和BamHⅠ的識(shí)別序列。

（3）根據(jù)圖1可知，據(jù)圖可知，在溫度為80℃，酶失活；溫度在60℃和70℃時(shí)，酶活性基本相等；根據(jù)圖2可知，溫度為60℃時(shí)酶的相對(duì)活性比70℃時(shí)的高；因此為高效利用BglB酶降解纖維素，可控制反應(yīng)溫度在60℃。

本題考查基因工程、酶、育種等知識(shí)，意在考查獲取信息、利用信息及所學(xué)知識(shí)進(jìn)行分析、判斷的能力及識(shí)圖能力

考點(diǎn)：本題考查基因工程和酶的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，能從圖形中獲取信息、利用信息及運(yùn)用所學(xué)知識(shí)進(jìn)行分析、判斷的能力。

考點(diǎn)分析： 考點(diǎn)1：基因工程、生物技術(shù)的安全性和倫理問(wèn)題 試題屬性

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