Question

【題目】下圖是科學(xué)家利用現(xiàn)代生物技術(shù)研制用于癌癥治療的鼠-人嵌合抗體的流程圖。請據(jù)圖回答：

（1）利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對鼠源雜交瘤抗體進行改造時，首先必須根據(jù)預(yù)期_______________________，設(shè)計_________________，進一步推測應(yīng)有的氨基酸序列，最終通過基因拼接，將鼠源抗體基因改造成鼠一人嵌合抗體基因，然后導(dǎo)入鼠淋巴細胞中使其 。在Ig基因表達載體構(gòu)建的過程中，人和鼠的基因要用 切割核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（2）圖中嵌合載體啟動子位于基因的首端，它是_____________識別和結(jié)合的部位，終止子是___________的終點；嵌合載體中還應(yīng)含有___________________，以便重組DNA的鑒定和篩選。

（3）圖中的“抗體分泌細胞”名稱是________，檢測目的基因在淋巴細胞中是否得到表達可采用_____技術(shù)。

（4）在制備單克隆嵌合抗體過程中要進行篩選，第二次篩選的目的是___________________________。

Answer 1

【答案】（1）嵌合抗體的功能 嵌合抗體的結(jié)構(gòu) 表達 同種限制酶

（2）RNA聚合酶 轉(zhuǎn)錄 標記基因

（3）漿細胞 抗原-抗體雜交

（4）獲得能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞

【解析】

試題分析：（1）蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對應(yīng)的脫氧核糖核苷酸序列（DNA），所以利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對鼠源雜交瘤抗體進行改造時，首先必須根據(jù)預(yù)期鼠一人嵌合抗體的功能設(shè)計預(yù)期嵌合抗體的結(jié)構(gòu)，進一步推測應(yīng)有的氨基酸序列，最終通過基因拼接，將鼠源抗體基因改造成鼠-人嵌合抗體基因，然后導(dǎo)入鼠淋巴細胞中使其表達；在構(gòu)建基因表達載體的過程中，用同一種限制酶能切割核苷酸之間的磷酸二酯鍵，可以形成相同的黏性末端。

（2）啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位；終止子是轉(zhuǎn)錄終止的信號；基因表達載體中含有啟動子、終止子、目的基因和標記基因，其中標記基因用于重組DNA的鑒定和篩選。

（3）圖中的“抗體分泌細胞”的名稱是漿細胞；檢測目的基因是否在受體細胞中表達，由于表達產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，因此常采用抗原-抗體雜交技術(shù)。

（4）制備單克隆抗體時要經(jīng)過兩次篩選，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞，第二次篩選的目的是獲得能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞。