Question

3．干擾素常用于治療病毒感染引起的疾病，現(xiàn)在可以通過(guò)基因工程大量獲得．請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題．
（1）基因工程的核心技術(shù)是構(gòu)建基因表達(dá)載體．
（2）通過(guò)PCR技術(shù)，可以獲得大量的干擾素基因片段．若已知干擾素的氨基酸序列，則獲取目的基因的較簡(jiǎn)單方法是人工合成法．
（3）將干擾素基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，可以培養(yǎng)出具有乳腺生物反應(yīng)器的奶牛．
（4）通過(guò)基因工程獲得干擾素，如果受體細(xì)胞為受精卵，則此過(guò)程還涉及到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件中需提供濃度為5%的CO₂，其主要作用是維持培養(yǎng)液的pH相對(duì)穩(wěn)定．
（5）轉(zhuǎn)基因技術(shù)是否成功，需要對(duì)受體細(xì)胞進(jìn)行分子水平的檢測(cè)，首先是檢測(cè)受體細(xì)胞染色體的DNA上是否插入目的基因，這是目的基因能否在真核生物中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵，利用的技術(shù)是DNA分子雜交技術(shù)．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體．
（2）PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因；已知干擾素的氨基酸序列時(shí)，獲取目的基因的較簡(jiǎn)單方法是人工合成法．
（3）將干擾素基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，可以培養(yǎng)出具有乳腺生物反應(yīng)器的奶牛．
（4）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件中需提供濃度為5%的CO₂，其主要作用是維持培養(yǎng)液的pH 相對(duì)穩(wěn)定．
（5）檢測(cè)受體細(xì)胞染色體的DNA上是否插入目的基因可采用DNA分子雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體      
（2）PCR   人工合成法      
（3）乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子
（4）維持培養(yǎng)液的pH 相對(duì)穩(wěn)定       
（5）DNA分子雜交技術(shù)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．