Question

16．基因工程靶向細胞療法也稱為生物免疫療法中的細胞治療技術(shù)，是目前國際公認的最具應(yīng)用前景的治療技術(shù)之一．它主要是根據(jù)細胞與分子免疫學原理，將患者自身的免疫細胞，在體外誘導產(chǎn)生大量能特異性識別并殺滅病毒及其感染細胞的效應(yīng)細胞，將其回輸患者自身后，對病毒進行精確性、特異性、主動式攻擊，殺滅體內(nèi)病毒，實現(xiàn)了真正的個體化治療．目前該技術(shù)主要用在治療尖銳濕疣、生殖器皰疹．治療過程如圖．
（1）要把目的基因從供體DNA長鏈準確地剪切下來，可不是一件容易的事．1968年，沃納第一次從大腸桿菌中提取出了限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），它能夠在DNA上尋找特定的“切點”，認準后將DNA分子的雙鏈交錯地切斷．DNA的分子鏈被切開后，還得縫接起來以完成基因的拼接．1967年，科學家們發(fā)現(xiàn)并提取出一種酶，這種酶可以將兩個DNA鏈連接起來，修復好斷裂口，并把這種酶叫作DNA連接酶．
（2）過程①是基因工程的核心步驟，構(gòu)建的重組質(zhì)粒上須有標記基因，其作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來．
（3）過程③細胞增殖時利用的生物技術(shù)是動物細胞培養(yǎng)，此技術(shù)需要的條件有無菌無毒、營養(yǎng)、適宜的溫度和PH和氣體環(huán)境．通入的氣體是5%的CO₂和95%的空氣．
（4）基因工程靶向細胞療法的特點：
a特異性：專攻感染的細胞，對正常細胞及其它機體組織無任何影響．
b主動性：增殖并活化的免疫細胞回輸后，可主動在體內(nèi)誘發(fā)免疫應(yīng)答反應(yīng)．
c高效能：特異性細胞免疫（填體液免疫或細胞免疫）清除感染細胞．
d記憶性：輸入到患者體內(nèi)的記憶細胞具有記憶功能．
e安全性：回輸?shù)拿庖呒毎麃碜曰颊咦陨�，無免疫排斥反應(yīng)，安全性高，毒副作用少．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運載體．需要限制酶來切割以獲取目的基因，同時需要相同的限制酶切割運載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過DNA連接酶連接目的基因和運載體．
2、動物細胞培養(yǎng)的條件：
（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．

解答 解：（1）限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開．DNA的分子鏈被切開后，DNA連接酶可以將兩個DNA鏈連接起來，修復好斷裂口．
（2）過程①表示基因表達載體的構(gòu)建，是基因工程的核心步驟，構(gòu)建的重組質(zhì)粒上須有標記基因，其作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來．
（3）動物細胞培養(yǎng)的技術(shù)需要的條件有無菌無毒、營養(yǎng)物質(zhì)、適宜的溫度和PH和氣體環(huán)境．通入的氣體是5%的CO₂和95%的空氣．
（4）細胞免疫過程中，效應(yīng)T細胞能夠清除感染細胞；記憶細胞能夠記住抗原的特點，即具有記憶功能；回輸?shù)拿庖呒毎麃碜曰颊咦陨�，因此不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，安全性高，毒副作用少．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）      DNA鏈       DNA連接酶
（2）鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來
（3）無菌無毒      營養(yǎng)         5%的CO₂和95%的空氣
（4）細胞免疫      記憶細胞     免疫排斥反應(yīng)

點評 本題考查了基因工程、動物細胞培養(yǎng)以及人體免疫調(diào)節(jié)的有關(guān)知識，要求考生能夠識記動物細胞培養(yǎng)的條件，掌握基因工程的操作步驟以及目的基因獲取的方法，識記細胞免疫的過程和特點，再結(jié)合所學知識準確答題．