Question

16．請回答下列生物技術(shù)方面的問題．
（1）菌落是在固體培養(yǎng)基上由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來的形態(tài)可見的子細(xì)胞群體．微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，
（2）菊花的組織培養(yǎng)的大致過程如圖所示：

圖中B、C依次表示脫分化、再分化過程（填名稱），添加的關(guān)鍵激素是細(xì)胞分裂素、生長素．該實(shí)驗(yàn)操作成功的關(guān)鍵是無菌操作（或無菌技術(shù)），所以要對外植體、超凈工作臺(tái)等消毒，對培養(yǎng)基（或培養(yǎng)器具）等滅菌．
（3）隨著環(huán)境污染的加劇和石油危機(jī)出現(xiàn)，越來越多的國家使用乙醇作為代替燃料，生產(chǎn)中玉米和麥草的秸稈可以用來生產(chǎn)燃料乙醉，已知秸稈的主要成分是纖維素，人們首先利用纖維素分解菌將纖維素分解，纖維素分解菌多分布在富含纖維素的土壤中，從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制鑒別培養(yǎng)基并加入特殊染料，當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌，這種篩選纖維素分解菌的方法是剛果紅染色法．

Answer 1

分析 1、菌落是固體培養(yǎng)基上由一個(gè)微生物細(xì)胞增殖后形成的肉眼可見的有一定形態(tài)的子細(xì)胞群體．
2、微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，前者是指通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種，逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，后者是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)．
3、植物組織培養(yǎng)是指離體的組織或器官在人工控制的培養(yǎng)基及環(huán)境條件下增殖分化成完整植株的一種無菌培養(yǎng)技術(shù)；基本過程：離體的植物組織或器官$\stackrel{脫分化}{→}$形成愈傷組織$\stackrel{再分化}{→}$長出叢芽→生根→移栽成活．決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要．
4、在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中，需要的條件：①消毒滅菌；②一定濃度的植物激素；③適宜的溫度；④充足的養(yǎng)料．植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長素和細(xì)胞分裂素；同時(shí)使用生長素和細(xì)胞分裂素時(shí)，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，細(xì)胞既分裂也分化．消毒和滅菌：外植體可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌．
5、剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)．當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物．當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈．這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．

解答 解：（1）菌落是在固體培養(yǎng)基上由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來的形態(tài)可見的子細(xì)胞群體．微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（2）圖中B、C依次表示脫分化、再分化過程過程，添加的關(guān)鍵激素是細(xì)胞分裂素、生長素，該實(shí)驗(yàn)操作成功的關(guān)鍵是無菌操作．
（3）纖維素分解菌多分布在富含纖維素的土壤，從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制鑒別培養(yǎng)基，剛果紅可以和纖維結(jié)合形成紅色復(fù)合物，纖維素分解菌將纖維素分解以后，紅色復(fù)合物消失，會(huì)形成透明圈．
故答案為：
（1）單個(gè)細(xì)胞   稀釋涂布平板
（2）脫分化、再分化   細(xì)胞分裂素、生長素    無菌操作（或無菌技術(shù)）
（3）纖維素  鑒別   透明圈   剛果紅染色法

點(diǎn)評 本題考查微生物的分離與培養(yǎng)、植物組織培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生對相關(guān)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理、步驟、操作技能的掌握情況．