Question

【題目】利用紫外線誘變選育高產(chǎn)β－胡蘿卜素的三孢布拉霉負(fù)菌，未突變菌不能在含有一定濃度的β－紫羅酮的培養(yǎng)基上生長，菌體隨β－胡蘿卜素含量增加從黃色加深至橙紅色。圖甲為選育及提取獲得β－胡蘿卜素流程，請回答下列問題：

（1）用紫外線照射三孢布拉霉負(fù)菌的目的是__________________。為選出高產(chǎn)突變菌種，還應(yīng)在培養(yǎng)基中添加__________________。

（2）某同學(xué)進(jìn)行正確的接種操作后，平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是______________（填“稀釋涂布平板法”或“平板劃線法”）；由于________，所以培養(yǎng)基上只有少數(shù)菌能生長形成菌落。

（3）進(jìn)行③過程時(shí)，應(yīng)選取________色的菌落接種至液體培養(yǎng)基。過程⑥是________，用紙層析法鑒定提取的胡蘿卜素粗品。

（4）將萃取的胡蘿卜素樣品與β－胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)樣品層析后進(jìn)行比對，結(jié)果如圖，從圖中分析可知，色帶________為β－胡蘿卜素。

Answer 1

【答案】誘導(dǎo)其發(fā)生基因突變 一定濃度的β-紫羅酮 稀釋涂布平板法 基因突變頻率低，只有少數(shù)突變的菌才能生長繁殖 橙紅 濃縮 I

【解析】

1、胡蘿卜素的提�。�
（1）胡蘿卜素的性質(zhì)：胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶，化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機(jī)溶劑。
（2）胡蘿卜素的提取來源
提取天然胡蘿卜素的方法主要有：一是從植物中提取；二是從大面積養(yǎng)殖的巖藻中獲得；三是利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)。
（3）萃取劑：最適宜作胡蘿卜素萃取劑的是石油醚。
（4）實(shí)驗(yàn)流程：
胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取（石油醚）→過濾_→濃縮→胡蘿卜素→鑒定（紙層析法）。

2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著劃線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）利用紫外線處理三孢布拉霉負(fù)菌的目的是使其發(fā)生基因突變。由于未突變菌不能在含有一定濃度的β-紫羅酮的培養(yǎng)基上生長，所以為選出高產(chǎn)突變菌種，還應(yīng)在培養(yǎng)基中添加一定濃度的β-紫羅酮。

（2）乙圖固體平板培養(yǎng)基中菌落均勻分布，該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；只有少數(shù)菌能生長形成菌落的根本原因是基因突變頻率低和不定向性，只有少數(shù)基因突變的菌才能生長、繁殖。

（3）菌體隨β-胡蘿卜素含量增加從黃色加深至橙紅色，因此選擇β-胡蘿卜素含量高的菌株時(shí)，應(yīng)選取橙紅色的菌落接種至液體培養(yǎng)基。過程⑥是濃縮，用紙層析法鑒定提取的胡蘿卜素粗品。

（4）據(jù)圖分析，色素帶Ⅰ與標(biāo)準(zhǔn)樣色素帶一致，故其為β胡蘿卜素。