Question

20. (2014 .湖北黃同中學(xué)期中) (16分) 1952年“噬菌體小組”的赫爾希和蔡斯研 究了噬菌體的蛋白質(zhì)和DNA在侵染過程中的功能，請(qǐng)回答下列有關(guān)問題：

(1) 如何獲得被³²P和³⁵S標(biāo)記的噬菌體？。

(2) 用標(biāo)記的噬菌體侵染未標(biāo)記的大腸桿菌。一段時(shí)間后,用攪拌器攪拌，然后 離心得到上清液和沉淀物。檢測上清液中的放射性,得到如圖所示的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 攪拌的目的是 ，所以攪拌時(shí)間應(yīng)至少大于 min,否則上清液中的放射性較低。當(dāng)攪拌時(shí)間足夠長時(shí)，上清液中的³⁵ S和³²P分別占初始標(biāo)記噬菌體放射性的80%和30%，說明 ;但上清液中³²P的放射性仍達(dá)到30%，其原因可能是。圖中“被侵染細(xì)菌”的存活率曲線的意義是作為對(duì)照，如果明顯低于100%，則上清液放射性物質(zhì)³²P的含量會(huì) 。

(3) ³²P標(biāo)記的某一個(gè)噬菌體侵染未標(biāo)記的大腸桿菌，最后產(chǎn)生100個(gè)子代噬菌體。子代噬菌體的DNA含有的P元素為 ，其形成的噬菌體的比例為 。

Answer 1

20. (16分，每空2分) 

(1) 用含³²P和³⁵S的培 養(yǎng)基分別培養(yǎng)大腸桿菌，再用噬菌體分別 侵染被³²P和³⁵S標(biāo)記的大腸桿菌

(2) 使噬菌體和細(xì)菌分離1. 5 DNA進(jìn) 人細(xì)菌，蛋白質(zhì)沒有進(jìn)人細(xì)菌部分噬菌 體未侵染進(jìn)人細(xì)菌增高

(3) ³¹P、³²P 50 : 1(或³²P、³¹P 1 : 50) 

解析：(1) 噬菌體只能寄生在活的細(xì)胞中， 不能用普通培養(yǎng)基培養(yǎng)，所以，要獲得被³² P和³⁵S標(biāo)記的噬菌體，先用含³²P和³⁵S的 培養(yǎng)基分別培養(yǎng)大腸桿菌，再用噬菌體分 別侵染被³² P和³⁵ S標(biāo)記的大腸桿菌。

(2) 用標(biāo)記的噬菌體侵染未標(biāo)記的大腸桿 菌。一段時(shí)間后，攪拌、離心得到上清液和 沉淀物。攪拌的目的是使噬菌體和細(xì)菌分 離。從圖中看出，攪拌時(shí)間大于1. 5 min , 上清液中的放射性較高。當(dāng)攪拌時(shí)間足夠 長時(shí)，上清液中的³⁵ S和³² P分別占初始標(biāo) 記噬菌體放射性的80%和30%,說明 DNA進(jìn)入細(xì)菌，蛋白質(zhì)沒有進(jìn)入細(xì)菌。上 清液中仍有少量³²P的放射性，主要原因 是部分噬菌體未侵染進(jìn)人細(xì)菌。如果時(shí)間 過長，被侵染的細(xì)菌破裂，會(huì)釋放出噬菌 體，上清液放射性物質(zhì)32P的含量會(huì)增高。

(3) 由于半保留復(fù)制，最初被標(biāo)記的兩條鏈 只參與形成兩個(gè)DNA分子，100個(gè)子代噬 菌體中，只有兩個(gè)是含有標(biāo)記鏈的。