Question

18．體外培養(yǎng)小鼠肝臟細(xì)胞，對(duì)于研究器官的生理、病理過(guò)程及其機(jī)制意義重大．如圖是一個(gè)培養(yǎng)新鮮小鼠的肝臟的裝置示意圖．請(qǐng)回答下列問(wèn)題．
（1）操作前，要將小鼠肝臟切成小薄片，并且用胰蛋白酶處理，獲得單個(gè)細(xì)胞．
（2）氣室中充入空氣加5%C0₂，C0₂的主要作用是維持溶液的pH．
細(xì)胞進(jìn)行的主要的呼吸作用的反應(yīng)式為：C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量
（3）在培養(yǎng)過(guò)程中要在無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境中進(jìn)行，通常在培
養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，目的是為了抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，防止培養(yǎng)過(guò)程污染．此
外還要定期更換培養(yǎng)液，以便清除肝細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，防止對(duì)肝細(xì)胞造成傷害．
（4）有機(jī)物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂．利用上圖所示裝置探究肝臟小塊對(duì)有機(jī)物X是
否具有解毒作用．
①在細(xì)胞培養(yǎng)液中培養(yǎng)造血干細(xì)胞，取4等份，備用．
②利用甲、乙、丙、丁4組按如圖所示裝置．按如表步驟操作（“√”表示已完成的步驟）．

	甲	乙	丙	丁
步驟一：加入培養(yǎng)液	√	√	√	√
步驟二：加入有機(jī)物X溶液	√		√
步驟三：放詈肝臟小塊	√	√

③培養(yǎng)一段時(shí)間后，取4組裝置中的等量培養(yǎng)液，分別添加到4等份備用的造血干細(xì)胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)．
④一段時(shí)間后取造血干細(xì)胞分別染色、制片．在顯微鏡下找到有絲分裂中期（時(shí)期）的細(xì)胞進(jìn)行觀察，并對(duì)比分析．若丙組淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異常，而甲組（乙和�。┑牧馨图�(xì)胞正常，則說(shuō)明肝臟小塊對(duì)有機(jī)物X具有解毒作用．

Answer 1

分析 1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：
（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．
2、探究實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循對(duì)照原則和單一變量原則．

解答 解：（1）把肝臟切成小薄片，并且用 胰蛋白酶處理，獲得單個(gè)細(xì)胞．
（2）氣室中充入5% CO₂的作用是維持培養(yǎng)液適宜的pH．
（3）為了防止雜菌的生長(zhǎng)，可在培養(yǎng)基中添加適量的抗生素．定期更換培養(yǎng)液的目的是為了清除 肝細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，防止對(duì)肝細(xì)胞造成傷害．
（4）觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目需在有絲分裂中期，此時(shí)染色體數(shù)目和形態(tài)最清晰；為有機(jī)物X對(duì)淋巴細(xì)胞的毒害作用，當(dāng)出現(xiàn)丙異常，甲乙丁正常，說(shuō)明對(duì)細(xì)胞的毒害是物質(zhì)X引起的，同時(shí)加入肝臟小塊和X時(shí)，細(xì)胞正常，說(shuō)明肝臟小塊對(duì)有機(jī)物X有解毒作用．
故答案為：
（1）胰蛋白酶
（2）維持溶液的pH   C₆H₁₂O₆+6H₂O+6O₂$\stackrel{酶}{→}$6CO₂+12H₂O+能量
（3）為了抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，防止培養(yǎng)過(guò)程污染     肝細(xì)胞的代謝產(chǎn)物
（4）有絲分裂中期    若丙組淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異常，而甲組（乙和�。┑牧馨图�(xì)胞正常．

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合探究實(shí)驗(yàn)，考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件；明確實(shí)驗(yàn)的目的，能根據(jù)實(shí)驗(yàn)原則完善實(shí)驗(yàn)步驟，并能根據(jù)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象得出正確的實(shí)驗(yàn)結(jié)論．