Question

【題目】有些人飲用牛奶后，不能完全消化牛奶中的乳糖。若將乳糖酶基因?qū)�入奶�；�因組中，可以使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大大減少，而其他營養(yǎng)成分不受影響。請回答下列問題：

(l)為了獲得乳糖酶基因，可以從人體細(xì)胞內(nèi)提取____來合成cDNA，再以cDNA為模板，利用 ___（填中文名稱）擴(kuò)增乳糖酶基因。

(2)質(zhì)粒載體作為基因工程的運載體，應(yīng)具備的基本條件有 ___（答出兩點）等。按其來源不同，基因工程中使用的DNA連接酶分為兩類，即 _____________。

(3)將重組表達(dá)載體導(dǎo)入奶牛受精卵常用的方法是____。為了獲得母牛，需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行 _________。

(4)在胚胎移植前，通過____技術(shù)能獲得多個胚胎從而獲得多個轉(zhuǎn)乳糖酶基因牛，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的 ______。

Answer 1

【答案】mRNA 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 有自我復(fù)制能力；有一個或多個限制酶的切割位點；帶有標(biāo)記基因；分子大小適宜 T4 DNA連接酶和E．coli DNA連接酶 顯微注射法 性別鑒定 胚胎分割 全能性

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）為了獲得乳糖酶基因，可以從人體細(xì)胞內(nèi)提取mRNA，反轉(zhuǎn)錄來合成互補(bǔ)DNA，即cDNA，然后通過多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）短時間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。

（2）質(zhì)粒載體作為基因工程的運載體，應(yīng)具備的基本條件有：有自我復(fù)制能力；有一個或多個限制酶的切割位點；帶有標(biāo)記基因；分子大小適宜等�；�因工程中使用的DNA連接酶為：T4 DNA連接酶和E．coli DNA 連接酶。

（3）將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞最有效的方法是顯微注射法，為了獲得母牛，需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行性別鑒定。

（4）胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)，通過該技術(shù)能獲得多個胚胎從而獲得多個轉(zhuǎn)乳糖酶基因牛，體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的全能性。