Question

14．基因疫苗指的是DNA疫苗，即將編碼外源性抗原的基因插入到質(zhì)粒上，然后將質(zhì)粒直接導(dǎo)入人或動(dòng)物體內(nèi)，讓其在宿主細(xì)胞中表達(dá)出抗原蛋白，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答．口蹄疫是一種危害嚴(yán)重的偶蹄動(dòng)物傳染病，近年來(lái)國(guó)內(nèi)外在口蹄疫基因疫苗研究方面有了許多新的突破．
回答下列問(wèn)題：
（1）將編碼外源性抗原的基因插入到質(zhì)粒上，此過(guò)程在基因工程中稱作基因表達(dá)載體的構(gòu)建，一般選受精卵作為受體細(xì)胞，將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞常采用的方法是顯微注射法．
（2）將導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞在體外培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚階段后進(jìn)行胚胎移植，選用的受體動(dòng)物應(yīng)符合的條件是雌性．
（3）欲檢測(cè)人或動(dòng)物體內(nèi)是否具有了抗原蛋白，在分子水平上檢測(cè)的方法是從轉(zhuǎn)基因人或動(dòng)物中提取蛋白質(zhì)，進(jìn)行抗原-抗體雜交．
（4）現(xiàn)已經(jīng)通過(guò)基因工程和胚胎工程技術(shù)培育出一頭具有口蹄疫免疫特性的高產(chǎn)奶牛，可以采用細(xì)胞核技術(shù)形成一個(gè)重組細(xì)胞，再經(jīng)早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)獲得具有口蹄疫免疫特性的多個(gè)胚胎，進(jìn)而克隆出多頭高產(chǎn)奶牛．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與表達(dá)：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）將編碼外源性抗原的基因插入到質(zhì)粒上，此過(guò)程在基因工程中稱作基因表達(dá)載體的構(gòu)建．在動(dòng)物基因工程中，一般選受精卵作為受體細(xì)胞，將目的基因?qū)�入受精卵常采用的方法是顯微注射法．
（2）將導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞在體外培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚階段后進(jìn)行胚胎移植，此處需要的是高產(chǎn)奶牛，因此選用的受體動(dòng)物應(yīng)為雌性．
（3）欲檢測(cè)人或動(dòng)物體內(nèi)是否具有了抗原蛋白，在分子水平上檢測(cè)的方法是從轉(zhuǎn)基因人或動(dòng)物中提取蛋白質(zhì)，進(jìn)行抗原-抗體雜交．
（4）現(xiàn)已經(jīng)通過(guò)基因工程和胚胎工程技術(shù)培育出一頭具有口蹄疫免疫特性的高產(chǎn)奶牛，可以采用細(xì)胞核技術(shù)形成一個(gè)重組細(xì)胞，再經(jīng)早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)獲得具有口蹄疫免疫特性的多個(gè)胚胎，進(jìn)而克隆出多頭高產(chǎn)奶牛．
故答案為：
（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建    受精卵    顯微注射法
（2）桑椹胚或囊胚    雌性
（3）抗原-抗體雜交
（4）細(xì)胞核     早期胚胎培養(yǎng)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的具體步驟及相關(guān)細(xì)節(jié)；識(shí)記胚胎移植的基本程序；掌握目的基因檢測(cè)與鑒定的方法，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．