Question

【題目】類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種自身免疫病，致殘性強(qiáng)。研究表明，該病的病理改變與腫瘤壞死因子-α(TNF-a)密切相關(guān)，而一種人鼠嵌合的抗TNF-a單克隆抗體能有效治療RA。下圖為該單克隆抗體制備過(guò)程示意圖。

(1)________________技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)，該過(guò)程中需要的氣體條件是_________。

(2)圖中的抗原A是_____________，常用的促融劑是___________。圖中“( )和抗體檢測(cè)”，括號(hào)內(nèi)應(yīng)填______________。

(3)細(xì)胞融合完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有_________。體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是__________________________________。

(4)單克隆抗體主要的用途有：________________________________(至少答出兩點(diǎn))。

Answer 1

【答案】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 95%空氣和5%CO2 腫瘤壞死因子-a(TNF-a) 聚乙二醇(PEG) 克隆化培養(yǎng) 骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞 細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100% 作為診斷試劑、用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物

【解析】

據(jù)圖分析，單抗制備過(guò)程：將特定的抗原注射小鼠，篩選出產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)細(xì)胞融合；篩選出雜交瘤細(xì)胞：B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，未融合的細(xì)胞死亡，而雜交瘤細(xì)胞存活；獲得能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

(1) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。該過(guò)程中需要的氣體條件是95%空氣和5%CO2，以保證細(xì)胞代謝所必需的氧氣和培養(yǎng)液的pH。

(2) 要制備抗TNF-a單克隆抗體需要給小鼠注射腫瘤壞死因子-a(TNF-a)。常用物理或化學(xué)方法促融，最常用的化學(xué)促融劑是聚乙二醇(PEG)。在抗體檢測(cè)之前需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，以增加雜交瘤細(xì)胞數(shù)量。

(3) 細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%，所以細(xì)胞融合完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞。

(4)單克隆抗體最廣泛的用途是作為診斷試劑；也可用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物，主要是用于癌癥治療、也有少量是是用于其他治療的。