Question

【題目】通過設(shè)計引物，PCR技術(shù)可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變。圖引物1序列中含有一個堿基T不影響引物與模板鏈的整體配對，反應(yīng)體系中引物1和引物2的5’端分別設(shè)計增加限制酶a和限制酶b的識別位點。有關(guān)敘述正確的是（ ）

A. 引物中設(shè)計相同的限制酶識別位點有利于目的基因定向插入

B. 在PCR反應(yīng)體系中還需加入核苷酸、解旋酶、Taq酶等

C. 第3輪PCR，引物1能與圖中②鏈的3’端結(jié)合，形成兩條鏈等長的突變基因

D. 第3輪PCR結(jié)束后，含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA占1/2

Answer 1

【答案】C

【解析】

PCR又稱多聚酶鏈式反應(yīng)，該反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中才能進行，如提供：DNA模板、分別與兩條模板鏈結(jié)合的兩種引物、四種脫氧核苷酸、耐熱的DNA聚合酶、同時通過控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進行。

引物1和引物2的5’端分別設(shè)計增加限制酶a和限制酶b的識別位點，有利于目的基因的定向插入，A錯誤；在PCR反應(yīng)體系中還需加入脫氧核苷酸、Taq酶等，不需要加入解旋酶，PCR中利用熱變性打開DNA雙鏈，B錯誤；通過2輪復(fù)制后，可以獲得以①鏈為模板合成的②鏈，經(jīng)過第三輪復(fù)制，以②鏈為模板，引物1能與圖中②鏈的3’端結(jié)合，形成兩條鏈等長的突變基因，C正確；第3輪PCR結(jié)束后，含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA只有一個，即以②鏈為模板合成的DNA分子，總DNA數(shù)目是23=8個，故含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA占1/8，D錯誤。因此，本題答案選C。