Question

10．科學家通過基因工程培育抗蟲棉時，需要從蘇云金芽孢桿菌中提取出抗蟲基因，“放入”棉花的細胞中與棉花的DNA結合起來并發(fā)揮作用，請回答下列有關問題：
（1）從蘇云金芽孢桿菌中切割抗蟲基因所用的工具是限制性內切酶，此工具主要存在于微生物中，其特點是一種限制性內切酶只能識別一種特定的核苷酸系列，并在特定的點位切割．
（2）基因表達載體的組成除了有目的基因外，還必須有復制原點、啟動子、終止子和標記基因．
（3）進行基因操作一般要經過的四個步驟是：獲取目的基因，構建基因表達載體，將目的基因導入受體細胞，目的基因的檢測與鑒定．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）從供體細胞中獲取目的基因需要利用限制酶．限制酶主要從原核生物中分離純化出來，能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端或平末端．
（2）基因表達載體的組成除了有目的基因外，還必須有復制原點、啟動子、終止子、標記基因．
（3）進行基因工程操作一般要經過的四個步驟是：目的基因的獲取；基因表達載體的構建（或目的基因與運載體結合）；將目的基因導入受體細胞；目的基因的檢測與鑒定．
故答案為：
（1）限制性內切酶    微生物  一種限制性內切酶只能識別一種特定的核苷酸系列，并在特定的點位切割．
（2）終止子   標記基因
（3）獲取目的基因 構建基因表達載體  將目的基因導入受體細胞  目的基因的檢測與鑒定

點評 本題考查基因工程的原理及技術，要求考生識記基因工程的原理，掌握基因工程的具體操作步驟及各步驟中需要注意的細節(jié)，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．