Question

【題目】兔肝細胞中的基因E編碼代謝甲醛的酶，擬利用基因工程技術(shù)將基因E轉(zhuǎn)入矮牽牛中，以提高矮牽牛對甲醛的代謝能力，請回答：

（1）從兔肝細胞中提取mRNA，在 酶的作用下形成互補DNA，然后以此DNA為模板在體外利用 反應大量擴增，得到基因E。在相關(guān)酶的作用下，將基因E與Ti質(zhì)粒連接在一起，形成 ，再導入用氯化鈣處理的 ，侵染矮牽牛葉片。將被侵染的葉片除菌后進行培養(yǎng)，最終得到轉(zhuǎn)基因矮牽牛。其中培養(yǎng)過程正確的是 。

A．葉片在含合適濃度生長素的培養(yǎng)基上分化形成愈傷組織

B．愈傷組織在含細胞分裂素和生長素配比較高的培養(yǎng)基上形成芽

C．再生的芽在細胞分裂素含量高的培養(yǎng)基上生根

D．愈傷組織在含合適濃度植物生長調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上脫分化形成再生植株

（2）取轉(zhuǎn)基因矮牽牛葉片，放入含MS液體培養(yǎng)基和適量濃度甲醛且密封的試管中，將試管置于 上，進行液體懸浮培養(yǎng)。一段時間后測定培養(yǎng)基中甲醛的含量，以判斷基因E是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達。培養(yǎng)過程中液體培養(yǎng)基的作用：一是提供營養(yǎng)；二是 ，從而使葉片保持正常形態(tài)。

Answer 1

【答案】（1）逆轉(zhuǎn)錄 聚合酶鏈式（PCR） 重組DNA分子 農(nóng)桿菌 B

（2）搖床 維持滲透壓

【解析】（1）以mRNA為模板合成DNA的過程為逆轉(zhuǎn)錄過程，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化；體外擴增DNA可采用PCR技術(shù)；在相關(guān)酶的作用下，將基因E與Ti質(zhì)粒連接在一起，形成重組DNA分子；將目的基因?qū)�入微生物細胞常用感受態(tài)細胞法，即用氯化鈣處理微生物細胞，使之處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)；將目的基因?qū)�入植物細胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。A。葉片在含合適濃度生長素和細胞分裂素的培養(yǎng)基上脫分化形成愈傷組織，A錯誤；B。愈傷組織在含細胞分裂素和生長素配比較高的培養(yǎng)基上形成芽，B正確；C。再生的芽在生長素含量高的培養(yǎng)基上生根，C錯誤；D。愈傷組織在含合適濃度植物生長調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基上再分化形成再生植株，D錯誤。故選：B。

（2）取轉(zhuǎn)基因矮牽牛葉片，放入含MS液體培養(yǎng)基和適量濃度甲醛且密封的試管中，將試管置于搖床上，進行液體懸浮培養(yǎng)。一段時間后測定培養(yǎng)基中甲醛的含量，以判斷基因E是否在轉(zhuǎn)基因矮牽牛中正常表達。培養(yǎng)過程中液體培養(yǎng)基的作用：一是提供營養(yǎng)；二是維持滲透壓，從而使葉片保持正常形態(tài)。