Question

3．胰島素是治療糖尿病的重要藥物．下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過程示意圖：

（1）圖中B的化學(xué)本質(zhì)是DNA．在⑥⑦過程中要用到的酶有DNA連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶．
（2）確診糖尿病常用的方法是檢測尿液中是否含有葡萄糖，且空腹時的血糖濃度持續(xù)高于160mg/dl．
（3）不能用人的口腔上皮細(xì)胞來代替圖中的人胰島B細(xì)胞，這是因為基因是選擇性表達(dá)的．
限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點是-G^↓GATCC-，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點是-^↓GATC-．在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因的兩側(cè)各有一個酶Ⅱ的切點．
（4）請畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端．
（5）請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端．
（6）在DNA連接酶作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端也能連接，這是因為：不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的操作過程示意圖．圖中①表示從胰島B細(xì)胞中獲取胰島素mRNA的過程；②為逆轉(zhuǎn)錄過程，A為胰島素基因；③④⑤表示目的基因的擴(kuò)增過程；⑥表示用限制酶切割運載體形成黏性末端的過程；⑦表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；⑧表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程；⑨表示目的基因隨著受體細(xì)胞的增殖和擴(kuò)增；⑩是從培養(yǎng)液中獲取胰島素的過程．

解答 解：（1）運載體的化學(xué)本質(zhì)的DNA，常用的極影工具酶是限制酶和DNA連接酶．
（2）確診糖尿病常用的方法是檢測尿液中是否含有葡萄糖，鑒定時常用斐林試劑，看是否出現(xiàn)磚紅色沉淀．
（3）由于在細(xì)胞分化過程中，基因是選擇性表達(dá)的，所以人的口腔上皮細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄出胰島素mRNA，因而不能利用口腔上皮細(xì)胞來完成①過程．
（4）質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端如圖所示：
．
（5）限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點是-^↓GATC-，因此目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端為：．
（6）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的，所以能夠連接起來．
故答案為：（1）DNA  限制酶和DNA連接酶
（2）檢測尿液中是否含有葡萄糖
（3）基因是選擇性表達(dá)
（4）
（5）
（6）上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的

點評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握基因工程各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題；識記限制酶的作用特點，能結(jié)合限制性內(nèi)切酶Ⅰ和限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列及切割位點準(zhǔn)確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．