【題目】為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶,研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α-淀粉酶基因(1656個堿基對),利用基因工程大量制備琢α-淀粉酶,實驗流程見下圖。請回答下列問題:
(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增α-淀粉酶基因前,需先合成兩條引物,并獲得細(xì)菌的_______________________。
(2)為了便于擴(kuò)增的DNA片段與表達(dá)載體連接,需在引物的____________________端加上限制性酶切位點,且常在兩條引物上設(shè)計加入不同的限制性酶切位點,主要目的_________________________。
(3)進(jìn)行擴(kuò)增時,反應(yīng)的溫度和時間需根據(jù)具體情況進(jìn)行設(shè)定,下列選項中________的設(shè)定與引物有關(guān),________的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長度有關(guān)。(填序號)
①加熱至90~95℃(變性)
②冷卻至55~60℃(復(fù)性)
③加熱至70~75℃(延伸)
④90~95℃維持時間
⑤55~60℃維持時間
⑥70~75℃維持時間
(4)下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列:
圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含________個密碼子,如虛線框后的序列未知,預(yù)測虛線框后的第一個密碼子最多有________種。
(5)獲得工程菌表達(dá)的α-淀粉酶后,為探究影響酶活性的因素,以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測定酶活性,結(jié)果如下:
緩沖液 | 50 mmol/LNa2HPO4-KH2PO4 | 50 mmol/LGly-NaOH | 50 mmol/LTris-HCl | ||||||||||
pH | 6.0 | 6.5 | 7.0 | 7.5 | 7.5 | 8.0 | 8.5 | 9.0 | 9.0 | 9.5 | 10.0 | 10.5 | |
酶相對活性% | 25.4 | 40.2 | 49.8 | 63.2 | 70.1 | 99.5 | 95.5 | 85.3 | 68.1 | 63.7 | 41.5 | 20.8 | |
根據(jù)上述實驗結(jié)果,初步判斷該α-淀粉酶活性最高的條件為___________________________
【答案】基因組DNA 5’ 使DNA片段能定向插入表達(dá)載體,減少自連 ② ⑥ 7 16 pH為8.0,緩沖液為50 mmol/LGly-NaOH
【解析】
PCR的原理是DNA雙鏈的復(fù)制,原料是四種游離的脫氧核苷酸,需要2種引物,需要耐高溫的DNA聚合酶。PCR包括:高溫變性;降溫復(fù)性;延伸子鏈。
(1)由題干信息可知,海洋生物含有α-淀粉酶基因,因此要首先獲得細(xì)菌的基因組DNA,從中提取并擴(kuò)增目的基因。
(2)引物可以引導(dǎo)子鏈的延伸,脫氧核苷酸是與引物的3’端相連的,故要在引物的5’端假說限制酶切點。常在2條引物上加入不同的限制酶切點,目的是使DNA片段能定向插入基因表達(dá)載體,防止自身相連。
(3)PCR擴(kuò)增時,②退火的溫度與引物長短和堿基種類有關(guān)。⑥70~75℃維持時間即延伸時間長短與擴(kuò)增片段的長度有關(guān)。
(4)圖中含有7個密碼子:AUG、CCA、UCA、ACA、AAU、ACU、AAG。虛線框后密碼子的第一位堿基是G,第二位有4種可能性,第三位有4種可能性,故密碼子種類是4×4=16種。
(5)由圖表可知,pH為8.0,緩沖液為50 mmol/LGly-NaOH中酶活性最高,為99.5。
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】下圖是某湖泊生態(tài)系統(tǒng)能量流動的定量分析〔圖中所示數(shù)值的單位是(J/cm2.a)〕為植物,G為植食,H為動物,C為肉食性動物。以下相關(guān)敘述不正確的是
A. 與該生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性密切相關(guān)的是圖中的G、H和C所形成的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)
B. 由G到H的能量傳遞效率為13.51%
C. 從生態(tài)學(xué)的觀點來看,G、H和C所包含的所有生物構(gòu)成生物群落
D. H包括多種動物,它們之間需求相似的構(gòu)成競爭關(guān)系
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】下列關(guān)于橘皮精油提取中應(yīng)注意的事項,不正確的是( )
A.橘皮在石灰水中浸泡時間為10小時以上
B.橘皮要浸透,從而壓榨時不會滑脫
C.壓榨液的粘稠度要高,從而提高出油率
D.壓榨時可加入相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%的小蘇打和5%的硫酸鈉,并調(diào)節(jié)pH為7~8
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】下列現(xiàn)象與圖示不相符合的是
A. 一片穩(wěn)定的森林中兔子的數(shù)量變化
B. 健康人腸道中大腸桿菌的數(shù)量變化
C. 健康人血漿中K+濃度變化
D. 健康人一生中酪氨酸酶活性的變化
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】為研究不同濃度的納米銀對藍(lán)藻光合作用和細(xì)胞呼吸的影響,研究人員用不濃度的納米銀溶液培養(yǎng)藍(lán)藻,實驗結(jié)果如下表所示。請回答下列問題:
納米銀濃度 (mg·L-1) | 光合速率 (μmolO2·m-2·s-1) | 細(xì)胞呼吸速率 (μmolO2·m-2·s-1) | 葉綠素a含量 (mg·g-1) |
0 | 10 | 1 | 0.070 |
1 | 3.3 | 0.3 | 0.025 |
5 | 1.2 | 0.2 | 0.018 |
10 | 0.201 | 0.001 | 0.005 |
(1)由表中數(shù)據(jù)可知,納米銀對藍(lán)藻的光合作用有抑制作用,據(jù)表分析其主要原因是____________________________________________。
(2)藍(lán)藻的遺傳物質(zhì)主要存在于___________,其細(xì)胞內(nèi)遺傳信息的傳遞途徑是______________________(用箭頭和文字表示)。
(3)在測定納米銀對藍(lán)藻細(xì)胞呼吸的影響時,應(yīng)在___________環(huán)境中進(jìn)行實驗。將在5mg·L-1納米銀條件下培養(yǎng)一段時間的藍(lán)藻取出后置于不含納米銀的條件下培養(yǎng),藍(lán)藻細(xì)胞呼吸速率始終低于1molO2·m-2·s-1,根據(jù)上表推測,主要的原因是______________________。藍(lán)藻細(xì)胞消耗氧氣的場所是___________。
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】某種昆蟲種群的翅型有野生型翅和卷翅兩種,已知該性狀是由位于常染色體上的一對等位基因控制的。請回答下列問題:
(1)某實驗室有一只卷翅昆蟲和多只野生型翅昆蟲,請利用它們完成下列實驗設(shè)計,來判斷這對相對性狀的顯隱性關(guān)系。
第一步:讓該卷翅個體與異性野生型翅個體雜交得到F1,且F1出現(xiàn)兩種性狀。
第二步:再讓____________________________________________得到F2。
結(jié)果與結(jié)論:若______________________,則_________________________________;若_________________________________,則_________________________________。
(2)若讓該種群中基因型如圖1所示類型的昆蟲雌雄個體相互交配,發(fā)現(xiàn)F1中卷翅︰野生型翅=3︰1,則卷翅是___________(填“顯性”或“隱性”)性狀。
(3)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)某品系昆蟲的1號染色體上基因的位置關(guān)系如圖2所示,且當(dāng)后代B基因純合時胚胎期致死。該品系的親代雌雄昆蟲相互交配(不考慮交叉互換和突變),子一代再自由交配,子二代中雜合子的概率是___________;自由交配n代以后,與親代的品系相比,子代中A基因的基因頻率下降,原因是____________________________________________。
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】三孢布拉霉菌能用來生產(chǎn)胡蘿卜素,但該菌株的高產(chǎn)性狀容易退化,需要定期篩選出高產(chǎn)菌株,研究表明菌體細(xì)胞內(nèi)含有可將無色的TTC還原為紅色復(fù)合物的物質(zhì),且菌體細(xì)胞內(nèi)該物質(zhì)的含量越高,還原能力越強(qiáng),胡蘿卜素合成能力也越強(qiáng)。結(jié)合下列篩選菌株及提取胡蘿卜素的流程圖回答問題:
三孢布拉霉菌→梯度稀釋→涂布到含TTC的培養(yǎng)基上→挑取單菌落→擴(kuò)大培養(yǎng)→收集菌絲并處理→萃取→鑒定
(1)胡蘿卜素的提取方法有從植物中提取等等。上述流程圖中提取到胡蘿卜素后鑒定一般要用________法。胡蘿卜素能夠治療夜盲癥、干皮癥等是因為夜盲癥、干皮癥等疾病是由于缺少維生素A而引起的,而1分子的β-胡蘿卜素可被氧化分解成2分子_____________。根據(jù)胡蘿卜素的理化性質(zhì)分析,為了讓胡蘿卜素更容易被人體吸收,炒胡蘿卜時要多加些________________。
(2)流程圖中將菌液涂布到含TTC的培養(yǎng)基上,目的是篩選出合成胡蘿卜素較強(qiáng)的菌體(高產(chǎn)菌株),含TTC的培養(yǎng)基屬于__________(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基。對照組需涂布等量的__________以判斷培養(yǎng)基是否被污染。挑取單菌落時,若菌落周圍____________,則菌株合成胡蘿卜素的能力較強(qiáng)。
(3)為了驗證萃取物是否是胡蘿卜素,該同學(xué)將葉綠素b、葉綠素a、葉黃素、萃取物和色素混合液(含葉綠素b、葉綠素a、葉黃素和胡蘿卜素)依次點樣在濾紙的1、2、3、4、5位置(如圖甲所示,并進(jìn)行分離,濾紙條上各色素帶的位置為____________(填字母)時,即可說明該萃取物最可能是胡蘿卜素。
查看答案和解析>>
科目:高中生物 來源: 題型:
【題目】如圖顯示了人體內(nèi)部分物質(zhì)的代謝途徑,字母代表物質(zhì),數(shù)字代表反應(yīng)過程。下列敘述錯誤的是
A.過程①和過程②分別發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體中
B.過程②過程③都有水的生成
C.物質(zhì)X產(chǎn)生物質(zhì)Y的同時也會產(chǎn)生大量[H]
D.過程③發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)中
查看答案和解析>>
湖北省互聯(lián)網(wǎng)違法和不良信息舉報平臺 | 網(wǎng)上有害信息舉報專區(qū) | 電信詐騙舉報專區(qū) | 涉歷史虛無主義有害信息舉報專區(qū) | 涉企侵權(quán)舉報專區(qū)
違法和不良信息舉報電話:027-86699610 舉報郵箱:58377363@163.com