Question

【題目】人類利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)使各種微生物經(jīng)過(guò)發(fā)酵作用制作各種食品，在這些操作過(guò)程中請(qǐng) 你通過(guò)相關(guān)微生物的形態(tài)、結(jié)構(gòu)以及生長(zhǎng)繁殖的環(huán)境條件等特點(diǎn)回答以下問(wèn)題：

（1）果酒的制作是利用酵母菌在______________的溫度條件且______________條件下產(chǎn)生酒精；利用醋酸菌制作果醋的過(guò)程中則有兩條途徑得以實(shí)現(xiàn)：一個(gè)是____________________________，另一個(gè)是____________________________。

（2）為了更好地研究這些微生物的生命特征，研究人員往往要先配制適宜的培養(yǎng)基，通常用______________對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)繁，用______________來(lái)觀察菌落特征以辨別菌種。

（3）將分別盛有9毫升水的6支試管滅菌，并按101-105編號(hào)，按下圖中操作對(duì)乳酸菌進(jìn) 行系列稀釋，則6號(hào)試管中菌液濃度為4號(hào)的______________，若在5號(hào)試管中取樣，在平板中涂布 出的菌落平均數(shù)為218，則原液中菌落濃度為______________個(gè)/毫升。

（4）在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的過(guò)程中甲乙兩組同學(xué)分別用______________測(cè)定同一樣品中的菌落數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中得到了不同的結(jié)果，甲組同學(xué)在第一個(gè)48小時(shí)內(nèi)涂了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)為215，為了增強(qiáng)可信度該同學(xué)又在第二個(gè)48小時(shí)內(nèi)的了第二個(gè)平板， 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)為232，在第三個(gè)48小時(shí)內(nèi)涂了第三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)為288；乙組同學(xué)則只用了一個(gè)48小時(shí)，同時(shí)涂了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)面落數(shù)分別為21、212和256，兩組同學(xué)都以這三個(gè)統(tǒng)計(jì)結(jié)果的平均數(shù)作為實(shí)驗(yàn)最終數(shù)據(jù)：甲組為247，乙組為163。你認(rèn)為_____的結(jié)果更接近真實(shí)值，你認(rèn)為這兩組的實(shí)驗(yàn)需要改進(jìn)嗎?_____；改進(jìn)方法是_______________________。

Answer 1

【答案】18-25℃ 缺氧和酸性 在氧氣和糖源都充足時(shí)葡萄汁中的糖分解為醋酸 當(dāng)缺少糖源時(shí)將乙醇變?yōu)橐胰�，進(jìn)而形成醋酸 液體培養(yǎng)基 固體培養(yǎng)基 1% 218╳105 稀釋涂布平板法 甲組 需要 甲組應(yīng)該同時(shí)涂三個(gè)平板，乙組應(yīng)該舍掉21那一組，重新取樣再做一組

【解析】

1、在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無(wú)菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖，再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2、醋酸菌好氧性細(xì)菌，當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在30℃～35℃。

3、稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）酵母菌產(chǎn)酒的最適溫度為18-25℃, 且缺氧呈酸性的條件下產(chǎn)生酒精；而醋酸桿菌產(chǎn)生果醋時(shí)在有糖和無(wú)糖的時(shí)候都可以完成，所以有兩條途徑，一個(gè)為在氧氣和糖源都充足時(shí)葡萄汁中的糖分解為醋酸，另一個(gè)為當(dāng)缺少糖源時(shí)將乙醇變?yōu)橐胰�，進(jìn)而形成醋酸。

（2）液體培養(yǎng)基可以使微生物和菌液充分接觸，提高微生物的生長(zhǎng)速率，所以可以用液體培養(yǎng)基對(duì)菌種擴(kuò)繁；而菌落的形成是在固體培養(yǎng)基上，所以用固體培養(yǎng)基觀察菌落特征。

（3）系列稀釋的操作是涂布計(jì)數(shù)之前的重要步驟，同時(shí)也涉及這之后對(duì)菌液濃度的估算，如本題圖所示，菌液每稀釋一次，濃度就減少到原來(lái)的1/10，所以6號(hào)是4號(hào)濃度的1/100，5號(hào)則是原液稀釋5次之后的濃度，所以原液濃度應(yīng)為218╳105個(gè)/mL

（4）測(cè)定活菌的數(shù)目通常使用稀釋涂布平板法；微生物計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)該選取30-300菌落數(shù)的平板，甲組統(tǒng)計(jì)了3次并求平均值，更接近真實(shí)值；微生物菌種是活菌，隨著時(shí)間變化細(xì)菌濃度會(huì)改變，所以操作不應(yīng)該分時(shí)間前后，因此甲組也不合理，應(yīng)該同時(shí)涂三個(gè)平板，而乙組計(jì)數(shù)時(shí)有21菌落數(shù)出現(xiàn)，應(yīng)該舍掉21那一組，為了增加信度應(yīng)重新取樣再做一組。