Question

1．干擾素是抗病毒的特效藥，干擾素基因缺失的個體，免疫力嚴重下降．科學(xué)家利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失的患者進行基因治療．根據(jù)所學(xué)的知識，回答以下問題：
（1）ES細胞是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞，在功能上具有（發(fā)育的）全能性．
（2）該過程需要構(gòu)建含有干擾素基因的基因表達載體，該結(jié)構(gòu)除啟動子外，還必須有終止子、標記基因和干擾素基因等．
（3）經(jīng)改造的胚胎干細胞移植之前先要進行動物細胞培養(yǎng)，該培養(yǎng)過程需要適宜的條件，其中CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的pH；為防止細菌的污染，可向培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；培養(yǎng)液應(yīng)定期更換，其目的是防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害．
（4）為檢測干擾素基因是否表達，可以采用抗原-抗體雜交的方法．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、動物細胞培養(yǎng)的條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．
（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．
（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO₂（維持培養(yǎng)液的PH）．
3、胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細胞團）．胚胎干細胞具有胚胎細胞的特性，體積較小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細胞．另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可以進行某些遺傳改造．

解答 解：（1）胚胎干細胞（ES細胞）是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞，在功能上具有發(fā)育的全能性．
（2）基因表達載體的組成包括：啟動、終止子、標記基因和目的基因（干擾素基因）等．
（3）動物細胞培養(yǎng)時，需要一定的氣體環(huán)境（95%的空氣和5%的CO₂），其中CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的pH；為防止細菌的污染，可向培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；培養(yǎng)液應(yīng)定期更換，其目的是防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害．
（4）檢測目的基因基因是否表達產(chǎn)生相應(yīng)的蛋白質(zhì)可采用抗原-抗體雜交的方法．
故答案為：
（1）原始性腺         （發(fā)育的）全能
（2）終止子   標記基因
（3）維持培養(yǎng)液的pH    抗生素   防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害
（4）抗原-抗體雜交

點評 本題考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記動物細胞培養(yǎng)的條件；識記胚胎干細胞的來源及特點，能結(jié)合所學(xué)的知識準確答題．