Question

【題目】2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻的科學家．綠色熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)部的移動情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能．下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，據(jù)圖回答：

（1）以上培育過程中應用到的生物技術有 ． （任選兩個）
（2）目前科學家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術制造出藍色熒光蛋白過程的正確順序是：（用數(shù)字表示）．
①推測藍色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②藍色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設計序列③藍色熒光蛋白基因的修飾（合成）④表達出藍色熒光蛋白．
（3）使用培養(yǎng)基進行胚胎干細胞培養(yǎng)時，通常要加入等天然成分．
（4）圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒．限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點是﹣G↓GATCC﹣，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點是﹣↓GATC﹣．在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個切點，在目的基因的兩側(cè)各有1個酶Ⅱ的切點．①請畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端 ． 在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能連接起來，理由是： ．

Answer 1

【答案】
（1）基因工程、核移植、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植任選兩個
（2）②①③④
（3）血清
（4）；兩個不同的限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端互補（答“相同且互補”也給分）
【解析】解：（1.）上述過程中，首先導入目的基因的豬的成纖維細胞要經(jīng)過動物細胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細胞，然后該細胞與豬的卵細胞進行細胞核移植獲得重組細胞，重組細胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)到桑葚胚或囊胚期，最后經(jīng)過胚胎移植技術將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內(nèi)，最后生成熒光克隆豬．其中涉及到的現(xiàn)代生物技術主要有基因工程、早期胚胎培養(yǎng)、細胞核移植、胚胎移植等．
（2.）蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列→相應基因的修飾改造或人工合成→相應的表達．
（3.）使用培養(yǎng)基進行胚胎干細胞培養(yǎng)時，通常要加入血清等天然成分．
（4.）限制酶識別特定的核苷酸序列，并在特定的切割位點切割，產(chǎn)生粘性末端．限制酶Ⅰ和Ⅱ切割后產(chǎn)生的粘性末端相同，即均產(chǎn)生GATC序列，因此可以用DNA連接酶連接起來．
【考點精析】本題主要考查了基因工程的原理及技術和基因工程的應用的相關知識點，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術；植物基因工程：抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物，利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)；動物基因工程：提高動物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物；基因治療：把正常的外源基因?qū)�入病人體內(nèi)，使該基因表達產(chǎn)物發(fā)揮作用才能正確解答此題．