Question

10．花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力．再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株．流程如圖1．

（1）過(guò)程①所需的酶是纖維素酶和果膠酶．
（2）過(guò)程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的葉綠體存在，這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志．
（3）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是保持原生質(zhì)體完整性．原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)細(xì)胞壁再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織．
（4）采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA 進(jìn)行PCR 擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株
的鑒定．如圖2是用該引物對(duì)雙親及再生植株1-4 進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果．據(jù)圖判斷，再生植株1-4中一定是雜種植株的有1、2、4．
（5）對(duì)雜種植株進(jìn)行黑腐病菌接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得抗黑腐病雜種植株的流程圖，其中①表示采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁的過(guò)程；②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過(guò)程；之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)即可得到雜種植株．

解答 解：（1）圖中①表示采用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁的過(guò)程．
（2）用于融合的兩個(gè)細(xì)胞，一個(gè)是黑芥苗的葉肉細(xì)胞，一個(gè)是花椰菜的根部細(xì)胞，其中供體細(xì)胞特有的結(jié)構(gòu)是葉綠體，因此可通過(guò)觀察葉綠體的有無(wú)作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志．
（3）原生質(zhì)體沒(méi)有細(xì)胞壁的保護(hù)，需要加入適宜濃度的甘露醇以保證滲透壓的穩(wěn)定，以避免原生質(zhì)體吸水或失水破壞原生質(zhì)體的完整性；原生質(zhì)體通過(guò)再生細(xì)胞壁形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而形成愈傷組織．
（4）根據(jù)圖譜，花椰菜含有堿基對(duì)為300和600的DNA片段，黑芥還有堿基對(duì)為1000、1300和1500的片段，再生植株3，只含有長(zhǎng)度為300和600的片段，與花椰菜一致，1、2、4 既含有花椰菜DNA 片段，又含有黑芥DNA片段，為雜種植株．
（5）對(duì)雜種植株接種黑腐病菌，能正常生長(zhǎng)的即為具有高抗性的雜種植株．
故答案為：
（1）纖維素酶和果膠酶 
（2）葉綠體 
（3）保持原生質(zhì)體完整性    細(xì)胞壁
（4）1、2、4         
（5）黑腐病菌

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合培育抗黑腐病雜種植株的流程圖，考查植物體細(xì)胞雜交的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記植物體細(xì)胞雜交的概念、過(guò)程及意義，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．