【題目】某研究所以馬尾藻巖藻聚糖(SF)為研究對象,體外培養(yǎng)小鼠肉瘤細(xì)胞S180,做抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)的研究。下列為部分實(shí)驗(yàn)步驟與結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)步驟:

①將S180腫瘤細(xì)胞以RPMI1640為培養(yǎng)液,在5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

②將上述培養(yǎng)過的S180腫瘤細(xì)胞經(jīng)酶消化,按1×1031×105·mL-1接種到96孔培養(yǎng)板,適宜條件下培養(yǎng)24h48h、72h、96h后,以MTT法(又稱比色法,一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法)于波長490nm處測定OD值,結(jié)果如圖1。

在適宜的培養(yǎng)條件和恰當(dāng)?shù)?/span>S180腫瘤細(xì)胞接種濃度下,研究不同濃度(0mg·mL-1、01mg·mL-1、05mg·mL-1、1mg·mL-1、2mg·mL-1、4mg·mL-18mg·mL-110mg·mL-1、15mg·mL-1、20mg·mL-125mg·mL-1、30mg·mL-1)的SFS180腫瘤細(xì)胞增殖的抑制情況,96h后以MTT法于波長490nm處測定OD值,結(jié)果如圖2

請回答下列問題:

1)步驟中以RPMI1640為培養(yǎng)液培養(yǎng)S180腫瘤細(xì)胞的原理是__________。培養(yǎng)液中除細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)之外,通常還添加一定量的__________,以防培養(yǎng)過程中的污染。

2)步驟消化所使用的酶是__________,為減少OD值測定的誤差,應(yīng)注意__________。

3)已知在一定細(xì)胞數(shù)目范圍內(nèi),MTT法測得的OD值與活細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān),由圖1可知步驟中恰當(dāng)?shù)?/span>S180腫瘤細(xì)胞接種濃度為__________·mL-1。

4)圖2實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在一定范圍內(nèi)SF濃度與細(xì)胞增殖的抑制作用呈__________(選填正相關(guān)負(fù)相關(guān)),當(dāng)SF濃度達(dá)到__________mg·mL-1時細(xì)胞增殖的抑制作用達(dá)到極限,繼續(xù)增加SF濃度對細(xì)胞增殖的抑制作用變化不明顯。

【答案】細(xì)胞增殖 抗生素 胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) 多測量,取平均值 5×103 25

【解析】

1)動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理:細(xì)胞增殖。動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組織)→剪碎用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng);動物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件:①無菌、無毒的環(huán)境:培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具應(yīng)進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加定量的抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染。此外應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,以便清除代謝產(chǎn)物防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。營養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等。在使用合成培養(yǎng)基時通常需加入血清、血漿等一些天然成分。溫度和PH。④氣體環(huán)境:細(xì)胞所需的氣體主要是O2CO2

2)根據(jù)題干信息,在一定細(xì)胞數(shù)目范圍內(nèi),MTT法測得的OD值與活細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān),圖2表示S180腫瘤細(xì)胞在不同濃度SF作用下生長曲線,SF濃度越大OD值越小,腫瘤細(xì)胞的數(shù)量越少,說明SF抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。

1)培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞的原理是細(xì)胞增殖。培養(yǎng)液中除細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)之外,通常還添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染。

2)步驟消化所使用的酶是胰蛋白酶,其作用是使動物組織細(xì)胞分散開,以獲得細(xì)胞懸液。在實(shí)驗(yàn)中求平均值可以減少實(shí)驗(yàn)誤差,所以為減少OD值測定的誤差,應(yīng)注意多次測量并求平均值。

3)已知在一定細(xì)胞數(shù)目范圍內(nèi),MTT法測得的OD值與活細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān),所以由圖1可知步驟中恰當(dāng)?shù)?/span>S-180腫瘤細(xì)胞接種濃度為5×103·mL-1。

4)圖2實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在一定范圍內(nèi),SF濃度與細(xì)胞增殖的抑制作用呈正相關(guān),當(dāng)SF濃度達(dá)到25mg·mL-1時細(xì)胞增殖的抑制作用達(dá)到極限,繼續(xù)增加SF濃度對細(xì)胞增殖的抑制作用變化不明顯。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

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【題目】胰島素可以改善腦神經(jīng)元的生理功能,其調(diào)節(jié)機(jī)理如圖所示,下列關(guān)于胰島素激活I(lǐng)nR后細(xì)胞反應(yīng)的敘述,錯誤的是

A. 抑制神經(jīng)元凋亡B. 促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞變性、壞死

C. 促進(jìn)神經(jīng)元攝取葡萄糖D. 促進(jìn)神經(jīng)元釋放神經(jīng)遞質(zhì)

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【題目】細(xì)胞間信息交流的方式多種多樣(如下圖)。相關(guān)說法正確的是(

A.細(xì)胞之間保持功能協(xié)調(diào)依賴于物質(zhì)和能量的交換及信息的交流

B.圖甲、乙、丙中信息交流的方式都離不開受體

C.神經(jīng)元之間興奮的傳遞通過圖乙的方式進(jìn)行

D.同一物種生物的雌雄配子間不能通過圖乙的方式傳遞信息

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【題目】14表示不同情況下某些物質(zhì)跨膜運(yùn)輸速度的曲線圖。下列相關(guān)敘述,錯誤的是(


A.可用圖1與圖3表示甘油進(jìn)入人的皮膚細(xì)胞

B.圖中B、D兩點(diǎn)的限制運(yùn)輸速度的主要因素不相同

C.可用圖2與圖3表示人體紅細(xì)胞吸收葡萄糖

D.圖中AC兩點(diǎn)的限制運(yùn)輸速度的主要因素不同

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【題目】某科研人員將綠色的小麥葉片放在溫度適宜的密閉容器內(nèi),在不同的光照條件下,測定該容器內(nèi)氧氣量的變化如圖所示。請分析回答:

1)在第10min時,葉肉細(xì)胞產(chǎn)生[H]ATP的細(xì)胞器是______。

2B點(diǎn)時,葉片的光合作用速率________(填“大于”、“小于”或“等于”)呼吸作用速率。A點(diǎn)以后的短時間內(nèi),葉片細(xì)胞內(nèi)C5的量將________。

3)在05min內(nèi),該容器內(nèi)氧氣量減少的原因是______。在515min內(nèi),該容器內(nèi)氧氣量增加的速率逐漸減小,這是因?yàn)?/span>_______

4)如果小麥葉片的呼吸速率始終不變,則在515min內(nèi),小麥葉片光合作用的氧氣產(chǎn)生量是_____mol

5)同一小麥植株的底部老葉呼吸作用強(qiáng)度比頂部幼葉弱,其內(nèi)部原因可能是________

6)若向密閉容器中加入18O標(biāo)記的O2,可在該綠色植物葉肉細(xì)胞中檢測到放射性的淀粉。18O最短的轉(zhuǎn)移途徑是_____。

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【題目】排尿是一種復(fù)雜的反射活動,當(dāng)膀胱被尿液充盈時,膀胱內(nèi)牽張感受器受到刺激產(chǎn)生沖動。人體的大腦皮層中有使人產(chǎn)生尿意并控制排尿反射的高級中樞。在脊髓灰質(zhì)中有能調(diào)節(jié)膀胱逼尿肌收縮、尿道括約肌舒張的低級中樞,完成排尿反射。如圖表示人體神經(jīng)系統(tǒng)不同中樞對排尿的調(diào)節(jié)過程,請回答以下問題:

1)嬰幼兒的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育不完全,排尿?qū)儆?/span>___________(填“條件反射”或“非條件反射”)。

2)當(dāng)膀胱壁牽張感受器受到尿液壓力刺激產(chǎn)生沖動,沖動到達(dá)b點(diǎn)時,神經(jīng)纖維膜內(nèi)外兩側(cè)的電位變?yōu)?/span>___________,在c處,b神經(jīng)元末梢將釋放___________,它能與___________結(jié)合,引起突觸后膜發(fā)生________變化,進(jìn)而引起a神經(jīng)元興奮。

3)脊休克是在脊髓第五頸段水平以下切斷脊髓后,實(shí)驗(yàn)動物表現(xiàn)為橫斷面以下脊髓所支配的反射均減退以致消失的現(xiàn)象,脊休克一段時間后,動物的簡單反射逐漸恢復(fù);謴(fù)后對動物在第一次離斷水平下方行第二次脊髓離斷術(shù),“脊休克”不再出現(xiàn)。以上實(shí)驗(yàn)說明,脊休克的發(fā)生是因?yàn)?/span>________________________,而非_________________________________

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如下圖所示。質(zhì)粒上有 PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn),同時質(zhì)粒中含有卡那霉素的抗性基因。以下敘述正確的是( )

A. 可以在香蕉組織塊的培養(yǎng)基中加入卡那霉素,以篩選成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌

B. 過程中構(gòu)建的重組質(zhì)粒除了目的基因和標(biāo)記基因還應(yīng)該包含起始密碼子和終止密碼子

C. 構(gòu)建含抗病基因的重組DNA分子A時,應(yīng)選用的限制酶有PstⅠ、EcoRⅠ

D. 轉(zhuǎn)基因抗病香蕉實(shí)質(zhì)是人為基因重組,具有不定向變異的特點(diǎn)

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【題目】玉米是世界上的第三大糧食作物,廣泛種植于世界各地。研究表明,轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米中的細(xì)菌BT基因能表達(dá)一種毒蛋白,這種毒蛋白能有效殺死玉米螟(一種農(nóng)業(yè)害蟲)。請回答下列問題:

1BT基因在基因工程中稱為_________。在基因表達(dá)載體中,除了要有BT基因外,還必須有啟動子、終止子和______。若將BT基因插入到Ti質(zhì)粒的_________上,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以使其導(dǎo)入玉米細(xì)胞并將其插入到玉米細(xì)胞中的染色體上。

2PCR是利用__________ 的原理,在利用PCR技術(shù)擴(kuò)增BT基因時,需要提供模板、原料、引物、______等條件,將模板DNA加熱至9095℃ 的目的是__________。

3BT基因與載體結(jié)合過程中需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。若某限制酶的識別序列和切點(diǎn)是,請畫出目的基因被限制酶切割后所形成的黏性末端_______。DNA連接酶對所連接的兩端堿基序列__________(沒有)專一性要求,定性地檢測BT基因的表達(dá)產(chǎn)物可采用____________________的方法。

4)為了防止抗蟲玉米通過花粉傳播帶來的生態(tài)學(xué)問題,科研小組考慮將抗蟲基因?qū)氲接衩赘饧?xì)胞的__________中以防止基因污染,同時在大規(guī)模種植的抗蟲玉米田中設(shè)置一個或多個避難所種植普通玉米,目的是_______________。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下圖所示為幾項(xiàng)生物工程技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)研究的流程圖。下列相關(guān)敘述,不正確的是(

A.整個流程運(yùn)用的生物技術(shù)有轉(zhuǎn)基因、動物細(xì)胞培養(yǎng)以及細(xì)胞融合等

B.過程是誘導(dǎo)干細(xì)胞中基因選擇性表達(dá)的結(jié)果

C.過程得到的 Z 細(xì)胞還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測及多次篩選

D.圖中的肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和 Y 細(xì)胞具有相同的基因組成

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