Question

【題目】為研究不同濃度靈芝多糖對(duì)體外培養(yǎng)的正常小鼠和腫瘤小鼠的巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響，請(qǐng)利用以下材料完成相關(guān)實(shí)驗(yàn)

材料與用具：生長(zhǎng)狀況相似的健康小鼠若干只、小鼠肉瘤細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、雞紅細(xì)胞、用培養(yǎng)液配制的靈芝多糖溶液(低、中、高濃度)、顯微鏡、二氧化碳培養(yǎng)箱等。

說(shuō)明：巨噬細(xì)胞可吞噬雞紅細(xì)胞，其吞噬功能可用吞噬率反映，即檢査100個(gè)巨噬細(xì)胞中已發(fā)生吞噬作用的巨噬細(xì)胞數(shù)。獲得巨噬細(xì)胞的方法和具體檢測(cè)方法不作要求。)

（1）完善實(shí)驗(yàn)思路：

①將生長(zhǎng)狀況相同的健康小鼠隨機(jī)分為2組，編號(hào)甲、乙。乙組小鼠注射一定量的小鼠肉瘤細(xì)胞，飼養(yǎng)一段時(shí)間后，選擇腫瘤模型鼠。

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（2）分析與討論

①巨噬細(xì)胞能通過(guò)細(xì)胞膜上的___________與異物結(jié)合，將異物吞入細(xì)胞內(nèi)，形成吞噬泡后與細(xì)胞內(nèi)的_____________融合而將異物消化分解。

②實(shí)際觀察表明，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)造成吞噬率下降，其原因是__________。

③研究發(fā)現(xiàn)本實(shí)驗(yàn)中的靈芝多糖溶液均可提高小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬率，且濃度越高促進(jìn)作用越強(qiáng)。請(qǐng)用柱形圖表示正常小鼠組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

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Answer 1

【答案】②取甲組小鼠的巨噬細(xì)胞平均分為4組，編號(hào)甲1至甲4(0.5分)；取乙組小鼠的巨噬細(xì)胞平均分為4組編號(hào)乙1至乙4；每組重復(fù)若干樣品(0.5分)

③將等量不含靈芝多糖的培養(yǎng)液和含低、中、高濃度靈芝多糖的溶液分別加入甲1乙1、甲2乙2…甲4乙4樣品中(0.5分)，分別在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間(0.5分)。

④從每組培養(yǎng)液中取出等量的巨噬細(xì)胞，加入等量雞紅細(xì)胞，培養(yǎng)一定的時(shí)間后，制作臨時(shí)裝片(0.5分)，在顯微鏡下計(jì)數(shù)100個(gè)巨噬細(xì)胞中吞噬有雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)，即為吞噬百分率(0.5分)。

⑤統(tǒng)計(jì)并分析數(shù)據(jù) 受體 溶酶體 被吞噬的雞紅細(xì)胞時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可被消化降解而觀察不到吞噬現(xiàn)象

【解析】

該實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖茄芯坎煌瑵舛鹊撵`芝多糖對(duì)正常小鼠和腫瘤小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響。方法采用不同濃度的靈芝多糖體外培養(yǎng)正常小鼠和腫瘤小鼠巨噬細(xì)胞，吞噬雞紅細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，制作臨時(shí)裝片，固定染色后置于顯微鏡下觀察，計(jì)數(shù)正常小鼠和腫瘤小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的數(shù)目，并計(jì)算吞噬率。

（1）①實(shí)驗(yàn)需探究不同濃度的靈芝多糖對(duì)正常小鼠和腫瘤小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響，根據(jù)實(shí)驗(yàn)所給材料，培養(yǎng)液配制的靈芝多糖溶液（低、中、高濃度），而因此一般正常小鼠和腫瘤小鼠的吞噬細(xì)胞各分為四組，分別取等量低、中、高濃度的靈芝多糖溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，各另取一個(gè)培養(yǎng)瓶不加靈芝多糖，作為空白對(duì)照。將樣品分別在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，從每組培養(yǎng)液中取出等量的巨噬細(xì)胞，加入等量雞紅細(xì)胞，培養(yǎng)一定時(shí)間后，制片，計(jì)數(shù)，計(jì)算吞噬率。因此在獲得腫瘤模型鼠后的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路為：②取甲組小鼠的巨噬細(xì)胞平均分為4組，編號(hào)甲1至甲4；取乙組小鼠的巨噬細(xì)胞平均分為4組，編號(hào)乙1至乙4；每組重復(fù)若干樣品。

③將等量不含靈芝多糖的培養(yǎng)液和含低、中、高濃度靈芝多糖的溶液分別加入甲1乙1、甲2乙2…甲4乙4樣品中，分別在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間。

④從每組培養(yǎng)液中取出等量的巨噬細(xì)胞，加入等量雞紅細(xì)胞，培養(yǎng)一定的時(shí)間后，制作臨時(shí)裝片，在顯微鏡下計(jì)數(shù)100個(gè)巨噬細(xì)胞中吞噬有雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)，即為吞噬百分率。

（2）①巨噬細(xì)胞能通過(guò)細(xì)胞膜上的受體與異物結(jié)合，將異物吞入細(xì)胞內(nèi)，形成吞噬泡被溶酶體消化分解。

②如果從每組培養(yǎng)液中取出等量的巨噬細(xì)胞，加入等量雞紅細(xì)胞后，培養(yǎng)一定時(shí)間后，鏡下可見(jiàn)吞噬細(xì)胞核呈藍(lán)色，被吞噬的雞紅細(xì)胞呈橢圓形，其胞漿呈紅色而核被染成藍(lán)色。若培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，被吞噬的雞紅細(xì)胞可被消化降解而觀察不到吞噬現(xiàn)象。

③根據(jù)題意可知，靈芝多糖溶液均可提高小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬率，且濃度越高促進(jìn)作用越強(qiáng)。故橫坐標(biāo)為0、低、中、高三種濃度的靈芝多糖溶液，縱坐標(biāo)為吞噬率，并且吞噬率依次增大。