Question

【題目】綿羊雖是第一種體細(xì)胞克隆成功的哺乳動(dòng)物，但該技術(shù)體系仍然存在效率低下的問(wèn)題，體外培養(yǎng)體系對(duì)綿羊體外胚胎發(fā)育至關(guān)重要。已有研究表明，在胚胎培養(yǎng)液中添加維生素C可顯著提高豬體細(xì)胞克隆胚胎囊胚率，但不知對(duì)綿羊克隆胚胎囊胚率是否有影響，某獸醫(yī)研究所對(duì)此進(jìn)行了研究。下圖為實(shí)驗(yàn)過(guò)程中獲得重組細(xì)胞的大致過(guò)程，回答下列問(wèn)題：

（1）圖示實(shí)驗(yàn)二屬于___________________移植，收集的小尾寒羊卵母細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)到_______________________________（時(shí)期）進(jìn)行去核，去核實(shí)際操作是用微型吸管吸出_________________________。

（2）下表分別為實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二在胚胎培養(yǎng)液中加入維生素C后的相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

實(shí)驗(yàn)一：不同濃度維生素C對(duì)綿羊孤雌胚胎發(fā)育的影響

維生素C濃度/（molL-1）	重復(fù)次數(shù)	胚胎總數(shù)	卵裂率	桑椹胚率（桑椹胚數(shù)/卵裂數(shù)）	囊胚率（囊胚數(shù)/卵裂數(shù)）
0	3	120	82.80	26.47	15.73
50	3	141	82.37	28.60	20.92
100	3	99	83.89	21.70	14.34
200	3	80	85.56	22.61	12.29

實(shí)驗(yàn)二：維生素C對(duì)綿羊體細(xì)胞克隆胚胎發(fā)育的影響

維生素C濃度/（molL-1）	重復(fù)次數(shù)	胚胎總數(shù)	卵裂率	桑椹胚率（桑椹胚數(shù)/卵裂數(shù)）	囊胚率（囊胚數(shù)/卵裂數(shù)）
x	3	70	83.93	28.89	14.96
0	3	76	87.05	22.53	9.47

①題圖中“孤雌激活處理”的實(shí)質(zhì)是_________________________，進(jìn)而能發(fā)育成早期胚胎，以便進(jìn)行實(shí)驗(yàn)一。

②據(jù)表中數(shù)據(jù)可知，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)一可以為實(shí)驗(yàn)二提供_________________________，實(shí)驗(yàn)二中“x”處數(shù)據(jù)應(yīng)為_________________________。

③綜合實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二結(jié)果可說(shuō)明_________________________。

Answer 1

【答案】體細(xì)胞核 減數(shù)第二次分裂中期（或M II中期） 細(xì)胞核和第一極體 激活卵母細(xì)胞使其增殖分化 所需的較適宜的維生素C濃度 50 在胚胎培養(yǎng)液中添加50μmol·L-1維生素C可顯著提高綿羊孤雌胚胎發(fā)育和體細(xì)胞克隆胚胎囊胚率

【解析】

題圖：涉及體細(xì)胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和孤雌生殖；

實(shí)驗(yàn)一、二：自變量為維生素C濃度，因變量為囊胚率（囊胚數(shù)/卵裂數(shù)）、卵裂率、桑椹胚率（桑椹胚數(shù)/卵裂數(shù)）。

（1）據(jù)圖可知，實(shí)驗(yàn)二屬于體細(xì)胞核移植，收集的小尾寒羊卵母細(xì)胞到減二中期時(shí)為最適合接受核移植的，此時(shí)第一極體與卵母細(xì)胞緊密接觸，故在使用微型吸管吸取卵母細(xì)胞核的同時(shí)會(huì)將第一極體吸出。

（2）①題圖中“孤雌激活處理”是為了使次級(jí)卵母細(xì)胞單獨(dú)發(fā)育為胚胎，故其實(shí)質(zhì)為激活卵母細(xì)胞使其增殖分化；②據(jù)表中數(shù)據(jù)可知，實(shí)驗(yàn)一相當(dāng)于實(shí)驗(yàn)二的預(yù)實(shí)驗(yàn)，可為實(shí)驗(yàn)二提供胚胎發(fā)育較適宜的維生素C濃度；“x”濃度下桑葚胚率和囊胚率都顯著高于濃度為0時(shí)，結(jié)合前文推知“x”為50。③綜合比較實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二各濃度下的數(shù)據(jù)，在胚胎培養(yǎng)液中添加50μmol·L-1維生素C可顯著提高綿羊孤雌胚胎發(fā)育和體細(xì)胞克隆胚胎囊胚率。